021-39921927
产品简介
大鼠微血管周细胞的相关*：通用型WNV（WEST NILE）病毒定量PCR扩增检测试剂盒 20次细胞WNV（WEST NILE）病毒定量PCR扩增检测试剂盒 20次组织WNV（WEST NILE）病毒定量PCR扩增检测试剂盒 20次体液WNV（WEST NILE）病毒定量PCR扩增检测试剂盒 20次WNV（WEST NILE）病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 2次通用
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1247 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠微血管周细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1247 |
商品介绍：
名称 大鼠微血管周细胞 2.组织来源：微血管组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠微血管周细胞分离自微血管组织；周细胞（pericyte）又称Rouget细胞和壁细胞，是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞，可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中，通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯，监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外，周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用，其多功能性是目前研究的热点之一，所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控；毛细血管受损时，周细胞还可增殖，分化为内皮细胞和成纤维细胞。 5.方法简介： 实验室分离的大鼠血管周细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法及不锈钢网筛过滤法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠微血管周细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R187 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
MAGI1 / CNKSR3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
MRPL44 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
VTI1A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
B3GALT5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Citrate synthase / CS 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL17 / IL17A CHO细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ROR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 OLR1 / LOX1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠微血管周细胞外致密纤维尾部蛋白4抗体Anti-ACE Antibody小鼠趋化因子elisa检测试剂盒品牌
2'-5'-寡腺苷酸合成2抗体Anti-ACAA2 Antibody(原货号PB1075)小鼠B因子elisa检测试剂盒品牌
µ-型受体抗体Anti-ACACB Antibody小鼠肿瘤坏死因子αelisa检测试剂盒
化D型受体抗体Anti-ACADS/SCAD Antibody小鼠内皮抑素elisa检测试剂盒品牌
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