产品简介

NAD激酶(NADK)测试盒微量法的相关产品：单宁酶(TAN)测试盒微量法单宁酶(TAN)测试盒紫外分光光度法单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒微量法蛋白质羰基测试盒微量法蛋白质羰基测试盒紫外分光光度法淀粉分支酶(SBE)测试盒微量法

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

商品属性：

测定意义：

NADK（EC 2.7.1.23）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。
测定原理：
NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH；NADPH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT），通过在600 nm下测定MTT的还原速度（吸光值的变化）可反映出NADK活性的大小。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 10 mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 25 mL×1 瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1 瓶，-20 ℃保存；

试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃保存；

组织样本的前处理：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量

（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，

加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤：

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、将试剂一和试剂二 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 15min 以上。

3、工作液Ⅰ的配制：在试剂三中加入 5mL 试剂一，充分混匀待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；

 工作液Ⅱ的配制：在试剂四中加入 18mL 试剂二，充分混匀待用；用不完的试剂分装后

-20℃保存，禁止反复冻融；

4、加样表

试剂名称(μL) 测定孔 对照管

样本 20 20

工作液Ⅰ 80

试剂一 80

充分混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 15min，立即煮沸2min（盖紧，防止水分散失）冰浴冷却，10000g，25℃离心 10min，取上清

上清液 40 40

工作液Ⅱ 160 160

加完试剂混匀，室温静置 15min，340nm 下测定吸光值，ΔA=A 测定-A 对照。

NADK 活性计算：

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1、血清（浆）NADK 活力的计算:

单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟生成 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=53.59×ΔA

2、组织、细菌或细胞中 NADK 活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=53.59×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /104cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=0.107×ΔA

V 反总：反应体系总体积，1×10-4

L；ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×103L / mol /cm；d：

比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.02 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：

反应时间，15 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞

总数，500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

1、血清（浆）NADK 活力的计算:

单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟生成 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=107.18×ΔA

2、组织、细菌或细胞中 NADK 活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=107.18×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=107.18×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。

NADK（nmol/min /104cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=0.214×ΔA

V 反总：反应体系总体积，1×10-4

L；ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×103

L / mol /cm；d：

96 孔板光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.02 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：

反应时间，15 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞

总数，500 万。

生化检测试剂盒实验操作说明：

一、抗氧化系列生化检测试剂盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）检测、总抗氧化能力（TAC）检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚（TP）含量检测试剂盒。

氧化酶（XO）活性分析试剂盒为例，提供了一种简单易用的比色分析法，用于测定各种样品中的XO活性，特点是测定血清，血浆，组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性，以及广泛的检测范围：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化检测试剂盒

包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢（H2O2）检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。

蛋白质羰基含量检测试剂盒（比色法）为例，提供了一种简单易用的比色法，用于分析不同生物样品（细胞/组织裂解液，生物液体）中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。

特点是：1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。

三、抗逆系列生化检测试剂盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例，提供一种简单易用的比色测定法，用于定量测定血清，血浆，组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。

特点是：1.测定血清，血浆，组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围：3.13- 200U/mL。

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