产品简介

NADP磷酸酶(NADPase)测试盒微量法公司正在出售的产品：自养无枝菌PCR检测试剂盒中央无浆体PCR检测试剂盒边缘无浆体PCR检测试剂盒嗜吞噬细胞无浆体PCR检测试剂盒无浆体通用PCR检测试剂盒十二指肠钩口线虫PCR检测试剂盒异尖线虫属PCR检测试剂盒变形丝囊霉菌PCR检测试剂盒侵入性丝囊霉菌PCR检测试剂盒丙蛛网菌PCR检测试剂盒马隐秘杆菌PCR检测试剂盒溶血隐秘杆菌PCR检测试剂盒

NADP磷酸酶(NADPase)测试盒微量法

本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
商品属性：

测定意义：

测定原理：

NADPase 能够催化 NADP+水解为 NAD+和无机磷的反应，通过测定无机磷的量来测定 NADPase 活性。

所需的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制：

提取液：100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 15 mL×1 瓶， 4℃保存。

试剂二：粉剂×4 支，-20℃保存；用时加入 1 mL 试剂一充分溶解备用，现配现用。

试剂三：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水，溶解后 4℃可保存一周。

试剂四：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水，溶解后 4℃可保存一周。

试剂五：液体 25mL×1 瓶，室温保存。

试剂六：10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制：将试剂六 20 倍稀释，即取 0.5mL 试剂六加 9.5 蒸馏水，充分混匀。

定磷试剂的配制：按 H2O: 试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷试剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若污染，定磷剂现用现配。

注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

样本的前处理：

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。810min，取上清，置冰上待测。

订购流程:

1、订购前,请与销售员核对产品中文名称/CAS号/英文名称等。

2、我司大部分产品都是现货,产品核实好下单后即可当天发货。(库存信息以当日为准)如有特殊要求请在发货前与销售员联系。

3、我司产品支持款到发货、快递代收尾款、网上现拍等付款方式。

4、质量保证,严格把关,如有产品异议经公司鉴定确认后可包换包退,免除客户后顾之忧。

5、我司提供完善的售后服务,使用过程中如有任何疑问,可提供技术指导。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 660nm，蒸馏水调零。

2、酶促反应（在 EP 管中加入下列试剂）

37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）准确反应 30min 后，95℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失），冷却后，10000g5min，取上清

3、定磷（在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂）

注意事项：

1、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格，要没有一点磷，若试管放过磷酸或磷酸盐缓冲液，干净，要先用洗洁精加水煮，再用自来水冲，最后用蒸馏水冲干净。最好用一次性塑料管或新玻璃管，避免磷污染是检测成

2、标准管、空白管和对照管只要做一次即可。

NADPase 酶活性计算：

1、按组织蛋白浓度计算：

定义：每小时每毫克组织蛋白 NADPase 分解 NADP 产生 1μmol 无机磷的量为一个 NADPase 活力单位。

NADPase (μmol/h/mg prot)=(C 标准管×V 总)×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V 样×Cpr)÷T=5×(A 测定管-A 对A 空白管)÷Cpr

2、按样本鲜重计算：

定义：每小时每 g 组织 NADPase 分解 NADP 产生 1μmol 无机磷的量为一个 NADPase 活力单位。

NADPase (μmol/h /g 鲜重)=(C 标准管×V 总)×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管）×V 总÷(W× V 样÷V 样总)÷T=5×(A

管)÷(A 标准管-A 空白管)÷WC 标准管：标准管浓度，0.5μmol/mL；V 总：酶促反应总体积，0.2mL；V 样：加入样本体积

V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，0.5 小时；Cpr：样本蛋白质浓度mg/mL；W：样本鲜重，g。

生化试剂盒的使用注意事项：

选择合适的试剂盒：根据实验目的和检测对象选择合适的试剂盒，确保实验的准确性和可靠性。

严格遵循说明书：按照试剂盒的说明书进行操作，避免误用或浪费。

注意保存条件：按照试剂盒的保存条件进行妥善保存，避免阳光直射、高温或潮湿等不利因素。

控制实验条件：在实验过程中严格控制实验条件，如温度、时间、pH值等，以确保实验结果的稳定性。

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