结肠平滑肌细胞的相关*:硬组织固着液(Susa 固着液) 50毫升软组织固着液(Bouin固着液) 50毫升骨组织固着液 50毫升活检组织固着液 50毫升抗原保护固着液(10%中性Formalin 固着液) 50毫升免疫荧光样品固着液(Michel固着液) 50毫升
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0829 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
结肠平滑肌细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0829 |
商品介绍:
名称 结肠平滑肌细胞 2.组织来源:结肠组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人结肠平滑肌细胞分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M",将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌;结肠运动少而缓慢,对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展,对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平,要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞,由于影响因素单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。 5.方法简介: 实验室分离的人结肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的人结肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H037 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 ACPP 基因全长ORF克隆
小鼠 ACTA1 基因全长ORF克隆
小鼠 CCNB2 基因全长ORF克隆
小鼠 ACO2 基因全长ORF克隆
小鼠 NPY 基因全长ORF克隆
小鼠 WBSCR22 基因全长ORF克隆
小鼠 HIST3H2A 基因全长ORF克隆
小鼠 CDK5R1 基因全长ORF克隆
小鼠 CCND2 基因全长ORF克隆
小鼠 H1F0 基因全长ORF克隆
结肠平滑肌细胞采样吸收液1-GVPC液体培养基 英文名称:GVPC Liquid Medium 产品规格:100g
0.312-20 ng/mL 人β位淀粉样前体蛋白裂解2(BACE2)ELISA试剂盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Sphingosine-1-phosphate lyase 1
NAC液体培养基 英文名称:NAC Solid Medium 产品规格:250g
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 4
15.6-1000 pg/mL 人胱硫醚β合成(CBS)ELISA试剂盒
1.56-100 ng/ml ELISA Kit for Human Serpin B13
0.156-10 ng/mL 人DNA(无/无碱基位点)裂解(APEX1)ELISA试剂盒
3%NaCl碱性蛋白胨水 英文名称: 产品规格:9ml*10支
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human 1-phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphate phosphodiesterase gamma-1