小鼠脑膜成纤维细胞的相关*:小鼠丝裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫试剂盒现货供应小鼠丝转肽抑制剂Kazal type 3(SPINK3)免疫试剂盒*直销小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫试剂盒进口、组装小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫试剂盒进口、分装小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫试剂盒现货供应
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1373 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠脑膜成纤维细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1373 |
商品介绍:
名称 小鼠脑膜成纤维细胞 2.组织来源:脑膜组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠脑膜细胞分离自脑膜组织;脑膜是颅骨与脑间的隔膜,一共有三层,由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。脑膜细胞围绕着大脑,参与中枢神经系统的正常发育,能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠脑膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠脑膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M239 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 GPNMB / Osteoactivin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
C7 / Complement component 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
NRG1-beta 1 (ECD) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
/ 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
B7-H4 / B7S1 / B7x 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠脑膜成纤维细胞L-α-磷脂酰-β-花生四烯酰-γ-硬脂酰 10 mg/mL 氯,即1ml大黄素甲 分析标准品,>98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr412) 化非受体激c-Abl抗体
氢钠铵 AR大黄酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr245) 化非受体激c-Abl抗体
3-噻吩-2-羧酰 97%青藤碱 分析标准品,≥97%Anti-phospho-c-Abl(Tyr204) 化非受体激c-Abl抗体
4--2,6-二氯吡 97%青藤碱 97%Anti-phospho-c-Abl(Thr735) 化非受体激c-Abl抗体
8-芘-1,3,6-三磺酸三钠盐 荧光级(-)-莽草酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) 化非受体激c-Abl抗体
4-苯甲脒 97%(-)-莽草酸 分析标准品,≥98%Anti-ABL2 ABL2蛋白抗体
4-喹哪 98% 98%Anti-ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗体
2-辛酸 98%盐酸坦索罗辛 98%Anti-ABP 雄结合蛋白抗体