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小鼠脑膜成纤维细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-21
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1373
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

产品属性: 

产品名称

规格

货号

小鼠脑膜成纤维细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1373

商品介绍:

名称    小鼠脑膜成纤维细胞 

2.组织来源:脑膜组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠脑膜细胞分离自脑膜组织;脑膜是颅骨与脑间的隔膜,一共有三层,由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。脑膜细胞围绕着大脑,参与中枢神经系统的正常发育,能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。

5.方法简介:

实验室分离的小鼠脑膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的小鼠脑膜成纤维细胞Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M239

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 GPNMB / Osteoactivin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 C7 / Complement component 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 NRG1-beta 1 (ECD) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 B7-H4 / B7S1 / B7x 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠脑膜成纤维细胞L-α-磷脂酰-β-花生四烯酰-γ-硬脂酰 10 mg/mL 氯,即1ml大黄素甲 分析标准品,>98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr412)  化非受体激c-Abl抗体

氢钠铵 AR大黄酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr245)  化非受体激c-Abl抗体

3-噻吩-2-羧酰 97%青藤碱 分析标准品,≥97%Anti-phospho-c-Abl(Tyr204)  化非受体激c-Abl抗体

4--2,6-二氯吡 97%青藤碱 97%Anti-phospho-c-Abl(Thr735)  化非受体激c-Abl抗体

8-芘-1,3,6-三磺酸三钠盐 荧光级(-)-莽草酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr89)  化非受体激c-Abl抗体

4-苯甲脒 97%(-)-莽草酸 分析标准品,≥98%Anti-ABL2  ABL2蛋白抗体

4-喹哪 98% 98%Anti-ABI1  ABI1/SSH3BP1蛋白抗体

2-辛酸 98%盐酸坦索罗辛 98%Anti-ABP  雄结合蛋白抗体

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