大鼠脑微血管周细胞的相关*:小鼠中性粒细胞明胶相关脂质运载蛋白(NGAL)免疫试剂盒现货供应小鼠中性粒细胞弹性蛋白(NE)免疫试剂盒*直销小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫试剂盒进口、组装小鼠脂联素(ADP)免疫试剂盒进口、分装小鼠脂肪酸合成(FASN)免疫试剂盒现货供应
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1329 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠脑微血管周细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1329 |
商品介绍:
名称 大鼠脑微血管周细胞 2.组织来源:大脑组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠脑微血管周细胞分离自脑微血管;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控;毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠脑微血管周细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠脑微血管周细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R222 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3-5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL1R1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 LAMP2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 REG1A / PSPS 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 XEDAR / EDA2R 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠脑微血管周细胞一氧化氮合成-2(抗原)Anti-C6 Antibody仑氨西林Lenampicillin
蛇巴曲抗原Anti-CA1 Antibody利福霉素BRifamycin B
一氧化氮合成-3(抗原)Anti-CA12 Antibody6-青霉烷酸6- aminopenicillanic acid
神经肽 Y(抗原)Anti-CA12 Antibody盐酸左Levofloxacin hydrochloride
谷受体(抗原)Anti-CA13 Antibody阿米卡星杂质AAmikacin?impurity A
神经生长因子-3(抗原)Anti-CA13 Antibody克拉维酸钾Potassium clavulanate
神经生长因子4/5(抗原)Anti-CA13 Antibody盐酸加替沙星Gatifloxacin hydrochloride
神经生长因子(抗原)Anti-CA14 Antibody头孢孟多酯Cefamandole Nafate