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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1259 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠嗅上皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1259 |
商品介绍:
名称 大鼠嗅上皮细胞 2.组织来源:嗅上皮组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠嗅上皮细胞分离自嗅上皮组织;嗅上皮细胞是鼻腔的嗅区黏膜的一种特殊的感觉性上皮细胞,嗅上皮细胞为棱形双极细胞,每个细胞表面为细长的嗅毛,突出于嗅区黏膜上皮细胞表面,而细胞的另一端为中央突,常汇成多数细微的嗅丝,组成嗅神经通向颅内。这些细胞的特殊结构,是嗅觉功能的重要组成部分。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠嗅上皮细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠嗅上皮细胞经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R192 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Optineurin / OPTN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Lysozyme 2 / LYZL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CASK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PTPN12 (aa 1-355) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PTPN2 / PTPT 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
MERTK / Mer (aa 578-872) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
DUSP3 / VHR 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠嗅上皮细胞PE-Cy7标记的羊抗人IgGAnti-SPRY2 Antibody水晶兰科5945-50-6价格
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