人Dickkopf 1ELISA检测试剂盒反应步骤:
(1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
(2)加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板"的出现。
(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。
(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
(9)应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。ELISA试剂盒豚鼠从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
人乳腺导管癌细胞;ZR-75-30
人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)
人膀胱癌细胞;5637(HTB-9)
人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]
人肾透明细胞癌;Caki-1
人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1
人食管癌细胞;EC109
人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15]
人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]
人乳腺癌细胞;MDA-MB-468
人肺支气管癌细胞;NCI-H1650
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H2087
人小细胞肺癌;NCI-H2227
人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23
人肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R
小鼠源细胞
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albino
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)
小鼠骨髓细胞;FDC-P1
小鼠垂体瘤细胞;GT1-1
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1
小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3
小鼠睾丸畸胎瘤细胞;P19
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12
小鼠血细胞;WEHI-3 [WEHI3]
小鼠成纤维细胞;φ2
小鼠红白血病细胞;MEL
小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14