小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa检测试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9801
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9803
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM0501
EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYB
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYM
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0902
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0903
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0911
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0906
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0909
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0907
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0920
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0927
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0922
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926
EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-01
EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-16
EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-29
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1008
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1036
肿瘤细胞
人肺癌细胞;A549 [A-549]
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]
人宫颈癌细胞;Hela
人乳腺癌细胞;MCF7
人乳腺癌细胞;MDA-MB-231
人乳腺癌细胞;MDA-MB-435S