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NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

产品简介

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:放线共生放线杆菌PCR检测试剂盒加州立克次体PCR检测试剂盒牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒类天花病毒PCR检测试剂盒粪产碱杆菌PCR检测试剂盒狷羚疱疹病毒型PCR检测试剂盒阿留申病病毒PCR检测试剂盒奥尔帕瓦约病毒PCR检测试剂盒交链孢霉属通用PCR检测试剂盒阿马帕里病毒PCR检测试剂盒鹅裂口线虫PCR检测试剂盒拟无枝菌菌通用PCR检测

产品厂地:上海市
更新时间:2025-03-10
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-SH116-B
规格50管/48样供货周期现货
主要用途仅供科研研究实验应用领域生物产业
检测方法可见分光光度法产品类别辅酶Ⅰ系列
品牌谷研货期现货

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
商品属性:
NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

货号

GOY-SH116-B

检测方法

可见分光光度法

规格

50管/48样

产品类别

辅酶Ⅰ系列


测定意义:

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。

测定原理

NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1 瓶,-20℃保存;

试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 14uL×1 支,4℃保存;

组织样本的前处

①总 GAPDH 酶提取:建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取上清测定。

②胞浆和叶绿体 GAPDH 酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一),冰浴匀浆后于 4℃,200g 离心 5min,弃沉淀,取上清4℃,8000g 离心 10min,取上清用于测定胞浆 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取清测定叶绿体中 GAPDH 酶活性。建议测定总 GAPDH 酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。细菌或培养细胞的前处理先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

测定步骤:
NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、 样本测定

(1)工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10 分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(2)在试剂三中加入 500μL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 样本、5μL 试剂三和 190μL 工作液,混匀,加入最后一个试剂的同时开始计时,记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算

单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算

单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=2.572×ΔA

V 反总:反应体系总体积,2×10-4L;ε:NADH 摩尔消光系数,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.005 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算

单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算

单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=5.144×ΔA

V 反总:反应体系总体积,2×10-4L;ε:NADH 摩尔消光系数,6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光径,0.5cm;V 样:加入样本体积,0.005 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

生化试剂盒的使用注意事项:
NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

选择合适的试剂盒:根据实验目的和检测对象选择合适的试剂盒,确保实验的准确性和可靠性。

严格遵循说明书:按照试剂盒的说明书进行操作,避免误用或浪费。

注意保存条件:按照试剂盒的保存条件进行妥善保存,避免阳光直射、高温或潮湿等不利因素。

控制实验条件:在实验过程中严格控制实验条件,如温度、时间、pH值等,以确保实验结果的稳定性。

公司正在出售的产品:
NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

脂氧合酶 (LOX)测试盒

植物全磷含量测试盒

植物硅含量测试盒

植物全碳(QC)含量测试盒

植物全钙浓度测试盒

植物硝态氮测试盒

植物全钾浓度测试盒

植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒

植物花色苷测试盒

植物原花青素(OPC)测试盒

植物可溶性钙浓度测试盒

抗胶原蛋白抗体检测试剂盒 CLA ELISA Kit

植物可溶性糖含量测试盒

人泛素ELISA试剂盒

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒

人泛素蛋白DELISA试剂盒

植物硅含量测试盒

人泛素连接ELISA试剂盒

植物花色苷测试盒

人芳香烃受体ELISA试剂盒

植物可溶性钙浓度测试盒

人肥大细胞类胰蛋ELISA试剂盒

植物可溶性糖含量测试盒

人肥胖抑制素ELISA试剂盒

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒

NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法人肺表面活性物质相关蛋白AELISA试剂盒

植物类黄酮测试盒

人肺表面活性物质相关蛋白BELISA试剂盒

植物全氮含量测定

人肺表面活性物质相关蛋白CELISA试剂盒

订购流程:
NADH氧化酶(NOX)测试盒可见分光光度法

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2、我司大部分产品都是现货,产品核实好下单后即可当天发货。(库存信息以当日为准)如有特殊要求请在发货前与销售员联系。

3、我司产品支持款到发货、快递代收尾款、网上现拍等付款方式。

4、质量保证,严格把关,如有产品异议经公司鉴定确认后可包换包退,免除客户后顾之忧。

5、我司提供完善的售后服务,使用过程中如有任何疑问,可提供技术指导。



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