5637 (人膀胱癌细胞)

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产品厂地：上海市

更新时间：2025-03-05

厂商性质：经销商

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品牌	其他品牌	货号	GOY-01X0002
规格	1×10⁶cells/T25培养瓶	供货周期	现货
主要用途	产品仅供科研使用	应用领域	化工

公司细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称	5637 (人膀胱癌细胞)
规格	1×10⁶cells/T25培养瓶
货号	GOY-01X0002

产品介绍：

名称 5637 (人膀胱癌细胞)

种属人类

年龄（性别）男性，68岁

组织来源膀胱；癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述 5637细胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~24-36小时

冻存条件冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

致瘤性 Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.

注意事项该细胞较难消化，注意延长消化时间，消化到细胞收缩变圆，轻拍培养瓶侧边，细胞可以滑落方可终止消化。

细胞特点及处理：

产品特点:
1、使用方便:不需昂贵设备。
2、可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。

细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

QQ截图20210907103850.png

细胞培养技巧：

一、冻存时的注意事项：
1. 在冷冻保存之前，应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高，冻存的细胞密度为80 – 90 ％优良
2. 冷冻前检测细胞是否保有其*性质，例如是否有杂细胞或者支原体等。
3. 使用的DMSO 应为试剂级等级，以5~10 ml 小体积分装，4 度避光保存，勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级，以高压蒸汽
灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。
4. 冷冻保存的细胞浓度：
4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，细胞浓度不要太高，某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。
4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6，依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷冻保护剂浓度为5 %或10 ％ DMSO，若是不确定细胞之冷冻条件，在做冷冻保存之同时，亦应作一个backup culture，以防止冷冻失败。

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使用方法：

收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

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