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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-SH116 |
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规格 | 100管/96样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研研究实验 | 应用领域 | 生物产业 |
检测方法 | 微量法 | 产品类别 | 辅酶Ⅰ系列 |
品牌 | 谷研 | 货期 | 现货 |
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称 | NADH氧化酶(NOX)测试盒微量法 | 规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 | 货号 | GOY-SH116 |
产品分类 | 辅酶Ⅰ系列 | 用途 | 仅供科研实验 |
测定意义:
NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将 NADH 氧化为 NAD。该酶不仅参而且与免疫反应密切相关。
测定原理:
NOX 能够将 NADH 氧化为 NAD,NADH 的氧化与 2,6 二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的 DCPIP被还原为无色的 DC测定蓝色 DCPIP 的还原速率计算出 NADH 氧化酶活性的大小。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 20mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂三:液体 1.5mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 5mL 蒸馏水,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
组织样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心 10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的 NOX(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10 秒,重复 30 次),用于 NOX 活性测定。
血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 600nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)试剂四于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育 5min。
(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、200μL 试剂四和 40μL 试剂五,混匀,记录 600nm处 20s 时吸光值 A1 和光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 600nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)试剂四于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育 5min。
(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、200μL 试剂四和 40μL 试剂五,混匀,记录 600nm处 20s 时吸光值 A1 和光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。
生化检测试剂盒实验操作说明:
一、抗氧化系列生化检测试剂盒
包括氧化酶(XO)活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)检测、总抗氧化能力(TAC)检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚(TP)含量检测试剂盒。
氧化酶(XO)活性分析试剂盒为例,提供了一种简单易用的比色分析法,用于测定各种样品中的XO活性,特点是测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性,以及广泛的检测范围:15.6 -500 mU/mL。
二、氧化系列生化检测试剂盒
包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢(H2O2)检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。
蛋白质羰基含量检测试剂盒(比色法)为例,提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品(细胞/组织裂解液,生物液体)中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。
特点是:1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。
三、抗逆系列生化检测试剂盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例,提供一种简单易用的比色测定法,用于定量测定血清,血浆,组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。
特点是:1.测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围:3.13- 200U/mL。
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