产品简介

甘油三酯(TG)含量测试盒微量法公司正在出售的产品：绿脓杆菌PCR检测试剂盒麻风杆菌PCR检测试剂盒麻疹病毒PCR检测试剂盒马传染性贫血病毒PCR检测试剂盒马铃薯Cry3c基因PCR检测试剂盒马流感病毒H3N8型PCR检测试剂盒马疱疹病毒1型PCR检测试剂盒马疱疹病毒4型PCR检测试剂盒马特定基因序列PCR检测试剂盒马腺疫链球菌PCR检测试剂盒猫弓形虫PCR检测试剂盒猫科研PCR检测试剂盒

甘油三酯(TG)含量测试盒微量法

本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
商品属性：

测定意义：

用异丙醇提取 TG，脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸（FFA），甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2，过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 处有特征吸收峰。

自备仪器和用品：

酶标仪、台式离心机、可调式移液枪、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配置：

试剂一：液体 120 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 12 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 12 mL×1 瓶，4℃避光保存。

TG 的提取：

1、 组织中 TG 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即TG 待测液。

2、细胞、细菌中 TG 的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），8000g，4℃离心 10min，取上清，即 TG 待测液。

3、血清（浆）样品：直接测定。

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、 样本测定

（1）工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10 分钟；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

（2）在试剂三中加入 500μL 蒸馏水，充分混匀待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

（3）在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 样本、5μL 试剂三和 190μL 工作液，混匀，加入最后一个试剂的同时开始计时，记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

（1）按样本蛋白浓度计算

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算

单位的定义：每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=1286×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算

单位的定义：每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/104cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=2.572×ΔA

V 反总：反应体系总体积，2×10-4L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.005 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

（1）按样本蛋白浓度计算

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算

单位的定义：每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=2572×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算

单位的定义：每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH（nmol/min/104cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=5.144×ΔA

V 反总：反应体系总体积，2×10-4L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103L / mol /cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.005 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。

生化试剂盒的使用注意事项：

选择合适的试剂盒：根据实验目的和检测对象选择合适的试剂盒，确保实验的准确性和可靠性。

严格遵循说明书：按照试剂盒的说明书进行操作，避免误用或浪费。

注意保存条件：按照试剂盒的保存条件进行妥善保存，避免阳光直射、高温或潮湿等不利因素。

控制实验条件：在实验过程中严格控制实验条件，如温度、时间、pH值等，以确保实验结果的稳定性。

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订购流程:

1、订购前,请与销售员核对产品中文名称/CAS号/英文名称等。

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