通用型PCR试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品,含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、上样染料等所有PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR反应,具有广泛的用途。
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-P3044 |
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规格 | 48T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅用于科研 | 应用领域 | 制药/生物制药 |
通用型PCR试剂盒使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100mg左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1mL溶液A中,95℃保温10-15分钟,加入0.1mL溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
通用型PCR试剂盒 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(最多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒图片15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A)毫升
染色液(t B)微升
稀释液(C)毫升
溶解液(tD)毫升
产品说明书1份
碱性橙21英文名称:Basic orange 21CAS号:3056-93-7分子式:350.88分子量: C22H23ClN2
2,4-二甲分子式:122.17分子量: C7H10N2英文名称:2,4- two amino tolueneCAS号:95-80-7
二硫二并噻唑分子式:332.49分子量: C14H8N2S4英文名称:Two two benzothiazole sulfideCAS号:120-78-5
对二硝分子式:168.11分子量: C6H4N2O4英文名称:Two nitrobenzeneCAS号:100-25-4
1-乙-2-甲咪唑分子式:135.17分子量: C7H9N3英文名称:1乙- 2 -甲咪唑CAS号:23996-55-6
2,5-二氟分子式:347.9分子量: C6H3FI2英文名称:2,5- two - iodineCAS号:147808-02-4
丁氟消草英文名称:Butyl fluorideCAS号:55283-68-6分子式:333.26分子量: C13H14F3N3O4
盐酸四咪唑分子式:240.75分子量: C11H13ClN2S英文名称:Hydrochloric acid fourCAS号:5086-74-8
1,3-二氯-2-分子式:272.9分子量: C6H3Cl2I英文名称:1,3- two -2- chlorine 4-iodoCAS号:19230-28-5
马兜铃内酰胺英文名称:AristololactamCAS号:13395-02-3分子式:293.27354分子量:C17H11NO4
汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒图片Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
ZNF431 锌指蛋白431抗体 0.2ml
Phospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体 0.1ml
Rabbit anti-horse IgG whole serum 兔抗马IgG抗血清 1ml
MARCH3 膜相关环指蛋白3抗体 0.2ml
phospho-ITGB4(Tyr1494) 磷酸化整合素β4抗体 0.1ml
PPO 腺样癌特异性相关抗原PPO抗体 0.2ml
phospho-CHEK1(Ser317) 磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 0.1ml
Blood Group Lewis a 血型Lewis a抗体 0.2ml
ATF3 活化转录因子3抗体 0.2ml
ALDH1L1 脱氢酶1蛋白家族L1抗体 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。