皱纹毛圆线虫PCR检测试剂盒品牌是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-P2904 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅用于科研 |
反应五要素:
皱纹毛圆线虫PCR检测试剂盒品牌参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
皱纹毛圆线虫PCR检测试剂盒品牌 | 50T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
皱纹毛圆线虫PCR检测试剂盒品牌15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
QG-56(人肺扁平上细胞)5×106cells/瓶×2
PBS规格:500mlgersion
NCI-H460(人肺细胞)5×106cells/瓶×2
mEPC, 小鼠内祖细胞-骨髓gersion
MLTC-1(小鼠睾间质细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HL-60, 人早幼粒白血病细胞
Anglne(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2
D283 Med(人脑髓母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎肝细胞英文名称:BNL CL.2
A9(小鼠下结缔组织细胞)5×106cells/瓶×2
天狼星红染色试剂盒规格:200ml
皱纹毛圆线虫PCR检测试剂盒品牌Mouse Anti-Goat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgG 0.1ml
FOG1 GATA结合蛋白1伴侣蛋白抗体 0.2ml
ET-1 内皮素-1抗体 0.2ml
DHRS7 视网膜短链脱氢酶/还原酶家族7抗体 0.2ml
AU1 tag AU1 tag标签抗体 0.1ml
CARM1 蛋白氨酸N甲基4抗体 0.1ml
phospho-Bcl 10(Ser218) 磷酸化Bcl-10抗体 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE PE标记的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗人IgG 0.1ml
Phospho-TAK1(Ser412) 磷酸化转化生长因子β活化激酶1 0.1ml
Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 0.1ml
phospho-E2F1 (Ser337) 磷酸化转录因子E2F-1抗体 0.1ml