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蔗糖含量测试盒微量法

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-03-04
厂商性质:经销商
访问量:267
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品牌其他品牌货号GOY-SH410
规格100管/96样供货周期现货
主要用途仅供科研研究实验应用领域生物产业
检测方法微量法产品类别蔗糖系列
品牌谷研货期现货

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

商品属性:

产品名称

蔗糖含量测试盒微量法

规格

100管/96样

检测方法

微量法

货号

GOY-SH410

产品分类

蔗糖系列

用途

仅供科研实验


蔗糖含量测试盒微量法

测定意义:

蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。
测定原理:
酸性条件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计/微量法、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1 瓶,-20℃保存;

试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 14μL×1 支,4℃保存;

组织样本的前处理:

①总 GAPDH 酶提取:建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取上清测定。

②胞浆和叶绿体 GAPDH 酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一),冰浴匀浆后于 4℃,200g 离心 5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g 离心 10min,取上清用于测定胞浆 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取上清测定叶绿体中 GAPDH 酶活性。

建议测定总 GAPDH 酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。细菌或培养细胞的前处理先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、 样本测定

(1)工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10 分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(2)在试剂三中加入 500μL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 样本、20μL 试剂三和 950μL 工作液,混匀,加入最后一个试剂的同时开始计时,记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

A2,计算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性计算

(1)按样本蛋白浓度计算

单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=1072×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算

单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=2.144×ΔAV 反总:反应体系总体积,1×10-3L;ε:NADH 摩尔消光系数,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.03 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

生化检测试剂盒实验操作说明:

一、抗氧化系列生化检测试剂盒

包括氧化酶(XO)活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)检测、总抗氧化能力(TAC)检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚(TP)含量检测试剂盒。

氧化酶(XO)活性分析试剂盒为例,提供了一种简单易用的比色分析法,用于测定各种样品中的XO活性,特点是测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性,以及广泛的检测范围:15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化检测试剂盒

包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢(H2O2)检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。

蛋白质羰基含量检测试剂盒(比色法)为例,提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品(细胞/组织裂解液,生物液体)中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。

特点是:1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。


蔗糖含量测试盒微量法


三、抗逆系列生化检测试剂盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例,提供一种简单易用的比色测定法,用于定量测定血清,血浆,组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。

特点是:1.测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围:3.13- 200U/mL。

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