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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-SH410-B |
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规格 | 50管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研研究实验 | 应用领域 | 生物产业 |
检测方法 | 可见分光光度法 | 产品类别 | 蔗糖系列 |
品牌 | 谷研 | 货期 | 现货 |
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称 | 蔗糖含量测试盒可见分光光度法 | 规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 | 货号 | GOY-SH410-B |
产品分类 | 蔗糖系列 | 用途 | 仅供科研实验 |
测定意义:
蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。
测定原理
酸性条件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。
所需的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
提取液二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 14μL×1 支,4℃保存;
组织样本的前处理:
①总 GAPDH 酶提取:建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体 GAPDH 酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液一),冰浴匀浆后于 4℃,200g 离心 5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g 离心 10min,取上清用于测定胞浆 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎 3s,间歇 7s,总时间 1min),然后 4℃,8000g 离心 10min,取上清测定叶绿体中 GAPDH 酶活性。
建议测定总 GAPDH 酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。细菌或培养细胞的前处理先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10 分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
(2)在试剂三中加入 500μL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 样本、20μL 试剂三和 950μL 工作液,混匀,加入最后一个试剂的同时开始计时,记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值
A2,计算 ΔA=A1-A2。
GAPDH 活性计算
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=1072×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 样÷V 样总) ÷T=2.144×ΔAV 反总:反应体系总体积,1×10-3L;ε:NADH 摩尔消光系数,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.03 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。
生化检测试剂盒实验操作说明:
一、抗氧化系列生化检测试剂盒
包括氧化酶(XO)活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)检测、总抗氧化能力(TAC)检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚(TP)含量检测试剂盒。
氧化酶(XO)活性分析试剂盒为例,提供了一种简单易用的比色分析法,用于测定各种样品中的XO活性,特点是测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性,以及广泛的检测范围:15.6 -500 mU/mL。
二、氧化系列生化检测试剂盒
包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢(H2O2)检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。
蛋白质羰基含量检测试剂盒(比色法)为例,提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品(细胞/组织裂解液,生物液体)中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。
特点是:1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。
三、抗逆系列生化检测试剂盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例,提供一种简单易用的比色测定法,用于定量测定血清,血浆,组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。
特点是:1.测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围:3.13- 200U/mL。
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土壤β木糖苷酶 (SβXYS)测试盒 | 土壤碱性蛋白酶(SALPT)测试盒 |
土壤过氧化氢酶(SCAT)测试盒 | 土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒 |
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土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒 | 土壤木质素过氧化物酶(SLiP)测试盒 |
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土壤多酚氧化酶(SPPO)测试盒 | 血红蛋白β检测试剂盒 HBβ ELISA Kit |
土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒 | 血红蛋白α2检测试剂盒 HBα2 ELISA Kit |
土壤β木糖苷酶 (SβXYS)测试盒 | 血红蛋白α1检测试剂盒 HBα1 ELISA Kit |
土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒 | 血管抑制蛋白2检测试剂盒 VASH2 ELISA Kit |
土壤铵态氮测试盒 | 血管抑制蛋白1检测试剂盒 VASH1 ELISA Kit |
土壤多酚氧化酶(SPPO)测试盒 | 血管抑素结合蛋白检测试剂盒 AMOT ELISA Kit |
土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒 | 蔗糖含量测试盒可见分光光度法血管舒张剂激活磷蛋白检测试剂盒 VASP ELISA Kit |
土壤汞(SHg)浓度测试盒 | 血管内皮生长因子145检测试剂盒 VEGF145 ELISA Kit |
土壤硅铝率测试盒 | 血管紧张素Ⅲ检测试剂盒 AngⅢ ELISA Kit |