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小鼠棕色脂肪细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-28
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1311
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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产品属性:   

产品名称

规格

货号

小鼠棕色脂肪细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1311

商品介绍:

名称    小鼠棕色脂肪细胞   

2.组织来源:脂肪组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠棕色脂肪细胞分离自棕色脂肪组织;动物体内存在棕色和白色两种脂肪,白色脂肪堆积在皮下,负责储存多余热量;棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪,将后者转化成二氧化碳、水和热量,本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色,其特点是组织中有丰富的毛细血管,脂肪细胞内散着许多小脂滴,线粒体大而丰富,核圆形,位于细胞中央,这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少,新生儿及冬眠动物较多,在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用,它们堆积在新生儿肩胛处,帮助维持体温。随着年龄增长,棕色脂肪会逐渐消失。最终,动物体内只残存少量棕色脂肪细胞,分布于颈部和锁骨。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。

5.方法简介:

实验室分离的小鼠棕色脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的小鼠棕色脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M213

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态梭形、多角形

传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 EDEM2 / C20orf31 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 TALLA-1 / TSPAN7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 MMGT1 / EMC5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 SEZ6L2 / PSK-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 TMED4 / ERS25 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 DBH / Dopamine beta-Hydroxylase 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 BPIFB1 / LPLUNC1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠棕色脂肪细胞 AR,99.0%4-溴-2-三氟酚 99%Anti-IGF II/IGF2  胰岛素样生长因子-II抗体

SP4-苄氧基-3-氯苯酸 98%Anti-IMP3/IGF-IIBP3  胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗体

99.98%,powder,粒径:10±5μm5-基-2-氟苯酸 97%Anti-IGSF8/CD316  球蛋超家族成员8抗体

99.99%,granular4-羧基苯酸 97%Anti-IKK alpha  KB抑制蛋白激α抗体

水质镉标样 0.1mg/l,分析标准品 2-氯-4-氟苯酸 98%Anti-IKK beta  KB抑制蛋白激β抗体

AR,powder,粒径:10±5μm2-羧基苯酸 97%Anti-IKK gamma   KB抑制蛋白激γ抗体

99.999%,granular2-氯-4-茴香酸 95%Anti-IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗体

2--6-甲基吡 98%5-氯-2-氟苯酸 97%Anti-phospho-IkB beta (Ser23)  化KB抑制蛋白β抗体

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