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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0863 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
兔肺大静脉内皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0863 |
商品介绍:
名称 兔肺大静脉内皮细胞 2.组织来源:肺静脉组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 兔肺大静脉内皮细胞分离自肺大静脉组织;肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中,把动脉血由肺送回心脏的静脉,是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对,共4条,两条连接右肺,两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接,而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压,是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下,肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点,肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力,要维持肺循环的低压、低阻的状态,必须保证整个肺循环系统的畅通无阻,血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉,再入左心室,经过左心室收缩进入体循环,才能避免肺动脉内压力升高。细胞呈多边形鹅卵石状排列;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。 5.方法简介: 实验室分离的兔肺大静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的兔肺大静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-Rb045 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传1-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 CTNNB1 基因全长ORF克隆
小鼠 FGF9 基因全长ORF克隆
小鼠 GSK3B 基因全长ORF克隆
小鼠 TLR6 基因全长ORF克隆
小鼠 WNT3 基因全长ORF克隆
小鼠 CD8B 基因全长ORF克隆
小鼠 WNT-4 基因全长ORF克隆
小鼠 MAP2K4 基因全长ORF克隆
小鼠 SEMA4D 基因全长ORF克隆
小鼠 SDC1 基因全长ORF克隆
兔肺大静脉内皮细胞胰蛋白胨大豆琼脂颗粒 英文名称:TSA Agar 产品规格:250g
0.312-20 ng/mL 人甘油酸激1(Phosphoglycerate kinase 1)ELISA试剂盒
改良爱德华琼脂基础 英文名称:Edwards Medium,Modified 产品规格:250g
15.6-1000 pg/mL 人胰高血糖素(Glucagon)ELISA试剂盒
3%NaCl乳糖 英文名称: 产品规格:20支
0.156-10 ng/mL 钩端螺旋体(Lep)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
0.156-10 ng/mL 人双重特异性促分裂原活化蛋白激激1(MAP kinase kinase 1)ELISA试剂盒
硝酸盐肉汤(还原)(军团菌) 英文名称: 产品规格:20支/盒
0.78-50 ng/mL 猪瘟病毒(CSFV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
0.156-10 ng/mL 人甘露糖结合蛋白C(MBP-C)ELISA试剂盒