小鼠肾上腺皮质细胞的相关*:猪白介素4(IL-4)免疫试剂盒进口、分装猪白介素3(IL-3)免疫试剂盒现货供应猪白介素22(IL-22)免疫试剂盒*直销猪白介素2(IL-2)免疫试剂盒进口、组装猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒进口、分装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1313 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠肾上腺皮质细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1313 |
商品介绍:
名称 小鼠肾上腺皮质细胞 2.组织来源:肾组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织;肾上腺是人体相当重要的内分泌器官,由于位于两侧肾脏的上方,故名肾上腺。肾上腺左右各一,位于肾的上方,共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形,右肾上腺为三角形。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质,内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分,分泌肾上腺素和去甲肾上腺素。这些激素在应激状态释放增多,能够帮助升高血压,加快心率,升高血糖,动员全身的储备物质,为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分,分泌醛固酮、皮质醇和少量的雌雄激素。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,正常数量的醛固酮,对维持人体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌,会导致高血压和低血钾。皮质醇是人体必需的激素之一。当人体处于应激状态时,比如感冒,发烧,遇到突发事件的时候,肾上腺皮质分泌大量的皮质醇,这些皮质醇能够动员机体的存储能源,为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当皮质醇缺乏时,机体在遇到重大事件的时候,往往缺乏足够应对能力,容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄激素,对男性来讲,,但是对女性而言,是雄激素的一个重要来源。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠肾上腺皮质细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠肾上腺皮质细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M214 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传1-2代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CDCP1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 Epcr / PROCR 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CD160 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
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