021-39921927
产品简介
小鼠精原干细胞的相关*：大量真/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 10次裂解液IX：真/酵母细胞裂解液 50次裂解液IX：真/酵母细胞强裂解液 20次真/酵母细胞可溶性总蛋白制备试剂盒 20次真/酵母细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒 20次真/酵母细胞浆可溶性总蛋白制备试剂盒 20次
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1173 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠精原干细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1173 |
商品介绍：
名称 小鼠精原干细胞 2.组织来源：睾丸组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠精原干细胞分离自睾丸组织；精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞，是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些*优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究，发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染，异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内，发生时一个受高度调控和持续的过程，精原干细胞（SSCs）一方面进行自我更新维持干细胞数量，另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处，是哺乳动物发生的最原始细胞，也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立，在生物学、医学、畜牧业及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群细胞，具有自我更新能力和多向分化潜能，是哺乳动物体内能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。 5.方法简介： 实验室分离的小鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化，结合Percoll密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的小鼠精原干细胞经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M160 换液频率每2-3天换液一次 生长特性悬浮 细胞形态球形 传代特性可传2-3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Integrin beta1 转录变体1A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
KIT 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
食蟹猴 BTLA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
Integrin beta1 转录变体1A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
RAC1 / MIG5 转录变体Rac1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
小鼠 IL2RB / CD122 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
MAP3K8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
GDF-15 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
VASN 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
DIXDC1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠精原干细胞组织相容性复合体α抗体Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相关抗体流式组化 XR0280R（抗大鼠）
肝生长因子激活抑制蛋白2抗体Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗体流式组化
HOMER2抗体Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬二甲酯盐酸盐
瘤病调控因子1抗体（锌指蛋白395）Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬
人类状瘤病18 E6单克隆抗体Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白（牛）
异质核糖核蛋白F抗体Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素（鸡蛋）
异质核糖核蛋白K抗体Human SCNM1 ELISA Kit透明质酸钠
异质核糖核蛋白L抗体Human SCNN1A ELISA Kit钠
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