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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0183 |
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规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
PANC-1 (胰腺癌细胞) | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0183 |
商品介绍:
名称 PANC-1 (胰腺癌细胞) 别称Panc-1; PANC.1; Panc 1; PanC1; Panc1; PANC1; Panc-1-P 种属人类 年龄(性别)男性,56岁 组织来源胰腺;胰管;上皮细胞癌 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述这株人胰腺癌细胞株PANC-1源自于胰腺癌导管细胞。PANC-1细胞倍增时间为52小时,G6PD活性处于低泳动性的B型。染色体研究表明,PANC-1细胞模式数目为63,包括3个*标记的染色体和1个小环状染色体。PANC-1细胞的生长可被1U/ml的左旋天冬酰胺酶抑制;PANC-1细胞能在软琼脂上生长,亦能在裸鼠上成瘤。 生物安全等级1 生长培养基DMEM+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:2-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~38-56小时 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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PANC-1 (胰腺癌细胞) 1瓶 HEL细胞株 HEL 低温运输和保存
0.85%无菌生理盐水(9ml/支) 0.85% Sterile Saline 9ml*20支/包
10mg 亲和素 Avidin -20℃保存
125mL RNase-Free TE Buffer(无RNase的TE缓冲液),20X,pH7.4 RNase-Free TE Buffer,20X,pH7.4 常温保存
1 管 JM83大肠杆菌 JM83 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低温运输,-20℃保存
250mL 动物RNAout (TRIzol) Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存