大鼠羊膜胚胎细胞的相关*:小鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)免疫试剂盒进口、组装小鼠细胞外信号调节激(ERK)免疫试剂盒进口、分装小鼠细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫试剂盒*直销小鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫试剂盒进口、组装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1359 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠羊膜胚胎细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1359 |
商品介绍:
名称 大鼠羊膜胚胎细胞 2.组织来源:胎盘组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠胚胎羊膜细胞分离自羊膜组织;羊膜为单层上皮细胞互相连接构成的薄膜。单层上皮细胞具有分泌羊水的作用。随着胚胎的生长发育,羊膜与绒毛密切紧贴,形成胎膜。胎膜随着羊膜腔逐渐扩大而呈半透明的薄膜,无血管,富有韧性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔内充满的液体为羊水。羊膜仅覆盖在胎盘的儿体面,并不深入胎盘组织中,随着妊娠的进展羊膜腔逐渐扩大,占据整个子宫腔,羊膜是胎膜最内一层,是一层半透明的薄膜,与覆盖在胎盘、脐带的羊膜层相连接。羊膜是胎盘的最内层,与人眼结膜组织结构相似,含有眼表上皮细胞,包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质,其光滑,无血管、神经及淋巴,具有一定的弹性,厚0.02~0.5mm,在电镜下,其分为五层:上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层,羊膜基底膜和羊膜基质层含有大量不同的胶元,主要为i、iii、iv、v、vii型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份,正是这些成份使羊膜可以充当“移植的基底膜"而发挥一种新的健康合适的基质。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成,均具有多分化潜能,可转化为神经元,且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠羊膜胚胎细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠羊膜胚胎细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R234 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Galactolipase / PNLIPRP2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RCN3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CNPY4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ERP72 / PDIA4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ERP72 / PDIA4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TMEM27 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CLDN11 / Claudin-11 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CFHR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠羊膜胚胎细胞α-连环蛋白抗体(钙粘蛋白相关蛋白)Catenin αHuman CEP290 ELISA Kit人前列腺素D合成(PGDS)ELISA试剂盒,
癌易感基因2相互作用蛋白抗体Human CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA Kit人血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒,
质连接蛋白1抗体Human CEP350 ELISA Kit大鼠雄(androgen)ELISA试剂盒,
盘状结构域受体蛋白2抗体Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit大鼠同型半胱(Hcy)ELISA试剂盒,
膜糖蛋白CD200抗体Human CEP44 ELISA Kit大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒,
胰羧肽A1抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒,
羧肽A2抗体Human CEP55 ELISA Kit兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒,
脑源性球蛋白超家族蛋白3抗体Human CD94 ELISA Kit抑制素β-B(Inhbb)ELISA试剂盒--动物,人