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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1003 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠表皮角质形成细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1003 |
商品介绍:
名称 大鼠表皮角质形成细胞 2.组织来源:皮肤组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠表皮角质形成细胞分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞,此类细胞为表皮的主体,由表皮深层始逐渐增殖、分化,并在成为角化的角质细胞中,细胞核与细胞器*消失,细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用,故不必在洗擦身体时用力搓擦,使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层,在上皮程序性死亡后,细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化,不能充分增殖。角质形成细胞最终产生角质蛋白,在其向角质细胞演变过程中,一般可以分为四层,即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外,在某些部位,特别在掌跖部位,角质层下方还可见到透明层。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠表皮角质形成层细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠表皮角质形成细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R094 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
食蟹猴 CD80 基因全长ORF克隆
食蟹猴 TNFSF13B 基因全长ORF克隆
食蟹猴 ATP1B3 / LOC716682 基因全长ORF克隆
食蟹猴 IL2RA 基因全长ORF克隆
食蟹猴 CD300LB 基因全长ORF克隆
食蟹猴 IFITM1 基因全长ORF克隆
食蟹猴 TLR8 基因全长ORF克隆
食蟹猴 TLR9 基因全长ORF克隆
食蟹猴 ENPEP 基因全长ORF克隆
食蟹猴 TLR3 基因全长ORF克隆
大鼠表皮角质形成细胞0.156-10 ng/mL 人干扰素诱导,双激活蛋白激滞留RNA(EIF2AK2)ELISA试剂盒
大肠菌群培养基(日本) 英文名称:Coliform Medium(Japan) 产品规格:250g
硫乙醇酸盐流体培养基管 英文名称: 产品规格:7.5ml*20支/盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Myogenin
15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列PG)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proteasome subunit beta type-9
V-J琼脂培养基(USP) 英文名称:Vogeljohnson Agar Medium 产品规格:250g
GC琼脂 英文名称:GC Agar Base 产品规格:250g
0.156-10 ng/mL 病毒H9亚型(AIV-H9)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)