大鼠精原干细胞的相关*:细蛋白(PROTEASE)活性荧光定量检测试剂盒 20次细蛋白(PROTEASE)比色法(405)定量检测试剂盒 20次细糖酵解红检测试剂盒 20次细糖酵解溴百里蓝(BTB)检测试剂盒 20次细柠檬酸利用检测试剂盒 20次细糖酵解MRVP检测试剂盒 20次
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1203 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠精原干细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1203 |
商品介绍:
名称 大鼠精原干细胞 2.组织来源:睾丸组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠精原干细胞分离自睾丸组织;精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些*优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内,发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSCs)一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合Percoll密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠精原干细胞经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R171 换液频率每2-3天换液一次 生长特性悬浮 细胞形态球形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
uPAR 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
CD40 / TNFRSF5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
CD40 / TNFRSF5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
IL5Ra 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
IL5Ra 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
interleukin 8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
interleukin 8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
BACE1 / ASP2 转录变体a 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
BACE1 / ASP2 转录变体a 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠 NCSTN 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
大鼠精原干细胞D-乙酯盐酸盐 BR(3-氯基)氧基硅烷 98%BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit 人β半乳糖苷
L-天门冬-β-苄酯 98%3-氯基二甲氧基硅烷 97%IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit 人αL艾杜糖苷酸
N-乙酰-D-谷 BRγ-缩水甘油氧基氧基硅烷 97%Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 人α2抗纤溶
N-乙酰-L-蛋 98.5%三乙氧基硅烷 97%NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) ELISA Kit 人N-乙酰-β-D-葡萄糖苷
N-乙酰-D- BR甲基三乙氧基硅烷 98%PAL(Human L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 人L苯解氨
BOC-O-苄基-L- 98%甲基氧基硅烷 98%5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit 人5核苷酸
叔丁氧羰基-L-赖 98%氧硅烷 95%1,3- BetaD-Glu(Human 1,3- BetaD glucosidase) ELISA Kit 人1,3-βD葡葡糖苷
BOC-甘 99%黄原胶 USP级CK(Human Creatine Kinase) ELISA Kit 人肌酸激