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大鼠神经少突胶质前体细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-26
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1397
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

产品属性: 

产品名称

规格

货号

大鼠神经少突胶质前体细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1397

商品介绍:

名称    大鼠神经少突胶质前体细胞 

2.组织来源:脑组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统,在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈珠状,故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞(oligodendrocyte)是中枢神经系统(CNS)的成髓鞘神经胶质细胞,其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是,细胞发育是一个连续的过程,其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限,因此,其分类是相对的。这三型分别为:型少突胶质细胞又称前O2Apre-O2A progenitor cell)。细胞呈圆形,表面光滑,直径约3μm,体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面,具有很强的分裂增殖潜力,表达神经节苷脂GM1、波形蛋白和多唾液酸神经粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion moleculePSA-NCAM)等。型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起,极少数为单极突起,直径约7μm,有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞,既可分化为少突胶质细胞又可分化为型星形胶质,故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cellO2A)。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达神经节苷脂GD3GQ(淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体),故常用A2B5抗体标记O2A型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力,为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力,又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出45条较粗大突起,表面还残留有A2B5标记物,同时也表达O1-O4抗原,无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网,大量表达半乳糖脑苷脂(galactocerebro sideGC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid proteinPLP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic proteinMBP)等,有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞(简称少突胶质细胞前体细胞)包括前O2AO2A和未成熟少突胶质细胞,前两者具有增殖能力。

5.方法简介:

实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/

6.质量检测:

实验室分离的大鼠神经少突胶质前体细胞A2B5免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件PLL0.1mg/ml

培养基含B-27PDGFbFGFPenicillinStreptomycin

产品货号CM-R308

换液频率每2-3天换液一次;

生长特性贴壁

细胞形态双极、多极形

传代特性不传代,不增殖,存活1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 IL9R / Interleukin 9 receptor 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CD55 / DAF 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 NGFR/ P75 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠神经少突胶质前体细胞N-甲基-N-基硅烷三氟乙酰 GC,≥98.5%铁 99.99% metals basisIntegrin alpha 1  整合素α1抗原

N-甲基-N-基硅烷三氟乙酰 95%还原铁粉 AR,100目Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)  整合素α4β7抗原

炔酸甲酯 97%还原铁粉 CP,100目Integrin AlphaE2/CD103  整合素αE2抗原

4-甲基-3-硝基吡 97%还原铁粉 98%,400目ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)  ENPP3抗原

2-甲基-3-丁炔-2- 98%铁标准溶液1.19-1.35mg/L,用于水分析IQGAP1  支架蛋白抗原

3-甲氧基苯基酸 97%纳米铁粉 99.9%,50nmIRF-1(Interferon regulatory factor-1)  干扰素调节因子抗原

4-甲氧基苯基酸 97%纳米铁粉 99.9%,80nmIRAK 2(IL-1 Receptor-associated Kinase 2)  白介素-1受体相关激2抗原

N-甲基-N-(基硅基)乙酰 97%苯乙酮 GCS,≥99.5% (GC)IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide  白介素-1受体拮抗剂抗原

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