021-39921927
产品简介
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1183 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 脐带血间充质干细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1183 |
商品介绍：
名称 脐带血间充质干细胞 2.组织来源：脐带血 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人脐带血间充质干细胞分离自脐带血；脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。近十几年的研究发现，脐带血中含有可以重建造血和免疫系统的造血干细胞，可用于造血干细胞移植；因此，脐带血已成为造血干细胞的重要来源。脐带血中含有大量的干细胞，干细胞是生命的种子，它会分化成机体的各种细胞，结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体；这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。间充质干细胞（MSC）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下，可分化为多种造血细胞以外的组织细胞，并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用；目前，多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞（HSC）的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相关并发症。 5.方法简介： 实验室分离的人脐带血间充质干细胞采用密度梯度离心法、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人脐带血间充质干细胞经CD29、CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H165 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右；3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 ALK-6 / BMPR-IB 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
SELPLG 基因全长ORF克隆 (密码子优化)(表达载体), 带Myc标签
ITLN2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
IGSF21 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
WT1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
ACTA2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
MUC1 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
LOXL4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
EGFL7 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
PRMT5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
脐带血间充质干细胞异丁基锂 1.6M 正己烷溶液2--3-甲基吡 95%Anti-Annexin I/FITC 荧光素标记人、大、小鼠膜粘连蛋白 I抗体IgG
（基硅烷）甲基化锂 0.56 M in hexanes核黄素-5′-钠盐水合物 73-79%(HPLC)Anti-Annexin II/FITC 荧光素标记膜粘连蛋白-2抗体IgG
基铝 2.0 M 甲苯溶液核黄素钠 93%Anti-Annexin III /FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 Ⅲ抗体IgG
3-溴苯甲酸 98%核黄素钠 USP级Anti-Annexin IV /FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 Ⅳ抗体IgG
2,5-二溴苯甲酸 96%盐酸去氧素 98%Anti-Annexin V/FITC 荧光素标记重组膜粘连蛋白-5(人)抗体IgG
对氟苯甲酸 98%醋酸氯己定 98%Anti-Annexin VI/FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 VI抗体IgG
对氟苯甲酸 99%,升华纯化盐酸洗必泰 96%Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 荧光素标记按蚊抗体IgG
3-氟苯甲酸 98%薯蓣皂素 分析标准品，>95%Anti-ANP/FITC 荧光素标记抗心钠肽（心钠素）抗体IgG
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