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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0995 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠成骨细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0995 |
商品介绍:
名称 小鼠成骨细胞 2.组织来源:颅骨组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠成骨细胞采用先用胰蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠成骨细胞经ALP染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M091 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
狗 IL20RA 基因全长ORF克隆
狗 IL13RA2 基因全长ORF克隆
狗 IL11RA 基因全长ORF克隆
狗 IL3RA 基因全长ORF克隆
狗 TGFB3 基因全长ORF克隆
狗 BMP5 基因全长ORF克隆
狗 BMP4 基因全长ORF克隆
狗 EFNB2 基因全长ORF克隆
狗 EFNA5 基因全长ORF克隆
狗 CX3CL1 基因全长ORF克隆
小鼠成骨细胞15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Fatty acid desaturase 2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Endoplasmin
Kovcas氏靛基质试剂盒 英文名称: 产品规格:5ml*2
0.156-10 ng/mL 人3-羟基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hepcidin prohormone
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-23 subunit alpha
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Mouse Serum amyloid A-3 protein
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human ADP-ribosyl cyclase 2
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Myoferlin
血平皿(9cm) 英文名称:Blood Agar Plates 产品规格:无