021-39921927
产品简介
大鼠主动脉外膜成纤维细胞的相关*：小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)免疫试剂盒进口、组装小鼠组织型纤溶原激活剂(t-PA)免疫试剂盒进口、分装小鼠组织多肽抗原(TPA)免疫试剂盒现货供应小鼠组织蛋白去乙酰化2(Hdac2/Yy1bp)免疫试剂盒*直销小鼠组织蛋白K(cath-K)免疫试剂盒进口、组装
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1323 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠主动脉外膜成纤维细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1323 |
商品介绍：
名称 大鼠主动脉外膜成纤维细胞 2.组织来源：主动脉组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠主动脉外膜成纤维细胞分离自主动脉血管外膜组织；血管外膜是由疏松结缔组织组成，其中含螺旋状或纵向分布的弹性纤维和胶原纤维。血管壁的结缔组织细胞以成纤维细胞为主，当血管受损伤时，成纤维细胞具有修复外膜的能力。有的动脉中膜和外膜的交界处，有密集的弹性纤维组成的外弹性膜。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。血管外膜成纤维细胞是血管外膜的主要组成细胞之一，其主要生理功能合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 5.方法简介： 实验室分离的大鼠主动脉外膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠主动脉外膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R219 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3-5代左右；3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL1R1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 LAMP2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 REG1A / PSPS 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 XEDAR / EDA2R 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠主动脉外膜成纤维细胞吡咯 99%聚乙烯缩丁 航空级Anti-NF-66/a-Internexin/FITC 荧光素标记α-中连蛋白抗体IgG
吡咯烷 99%聚乙烯缩丁 M.W.40,000-70,000Anti-NFAM1/CNAIP/FITC 荧光素标记NFAM1抗体IgG
葡萄糖 AR聚乙烯缩丁 M.W.90,000-120,000Anti-NFATc1/FITC 荧光素标记活化T核因子1蛋白抗体IgG
葡萄糖 CP聚乙烯缩丁 M.W.170,000-250,000Anti-NFBD1/MDC1/FITC 荧光素标记DNA损伤关卡蛋白1抗体IgG
葡萄糖 GR，99%二硅化钼 99%Anti-p-NFATc2/FITC 荧光素标记化NFATc2抗体IgG
葡萄糖 ACS铝镍合金 Ni：47%Anti-NF-H/FITC 荧光素标记高分子量神经丝蛋白抗体IgG
葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)氧化钙 <160 nm particle size (BET), 98%Anti-Phospho-Merlin (Ser518) /FITC 荧光素标记化2型神经纤维瘤抗体IgG
葡萄糖 分析标准品氯亚铂酸铵 铂含量：52.0%Anti-NF-L/FITC 荧光素标记低分子量神经丝蛋白抗体IgG
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