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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0923 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠肾小球内皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0923 |
商品介绍:
名称 大鼠肾小球内皮细胞 2.组织来源:肾组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形,单层贴壁生长;细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧,与血流直接接触,是肾小球滤过膜的第一道屏障,可粘附细菌和白细胞,修复基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化,结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R063 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
甲型流感 H5N1 (chicken/Yamaguchi/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004)神经 (Neuraminidase / NA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H1N1 (Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H5N1 (Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H4N8 (chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H3N2 (Babol/36/2005)神经 (Neuraminidase / NA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
乙型流感 (Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H1N1 (New York/18/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)
大鼠肾小球内皮细胞0.312-20 ng/mL 人C-X-C趋化因子受体5(CXC-R5)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL 人增殖细胞核抗原相关因子(PCNA-associated factor)ELISA试剂盒
硅酸盐细菌培养基 英文名称:Silicate Bacteria Medium 产品规格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 1
78-5000 pg/mL 人70kDa热休克蛋白6(HSPA6)ELISA试剂盒
测定培养基 英文名称:Folic Acid Assay Medium 产品规格:250g
6.25-400 pg/mL 人垂体肿瘤转化基因2(PTTG2)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL 人硫酸酯2(SULF2)ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 19
0.312-20 ng/mL 人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒