小鼠肾足突细胞的相关*:血液血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性比色法定量检测试剂盒 20次体液血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性比色法定量检测试剂盒 20次细胞血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性荧光定量检测试剂盒 20次组织血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性荧光定量检测试剂盒 20次血液血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性荧光定量检测试剂盒 20次体液血管紧张素Ⅰ转化(ACE)总活性
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0933 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠肾足突细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0933 |
商品介绍:
名称 小鼠肾足突细胞 2.组织来源:肾组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠肾足突细胞分离自肾组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。足细胞(podocyte)即肾小囊脏层上皮细胞,它附着于肾小球基底膜(GBM)的外侧,连同GBM和毛细血管内皮一起构成了肾小球血液滤过屏障。足细胞特殊的解剖位置,使得其体内研究较为困难;又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖。足细胞呈星型多突状,胞体较大,由胞体伸出许多突起,又称足突(FP),呈指状交叉复盖于GBM外表面,并通过黏附分子和蛋白多糖分子与GBM相连。足细胞在正常情况下可以分泌GBM的主要组成成分,IV型胶原和纤维连接蛋白(FN);在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解GBM作用的基质金属蛋白酶(MMPs)和组织蛋白酶,从而在GBM的代谢平衡中发挥重要作用。足细胞之间邻近的足突相互交替,形成了许多30-40nm的裂孔,孔上覆盖一层厚4-6nm的裂孔隔膜,即肾小球足突间裂孔隔膜。后者是血浆蛋白通过脉管系统的最后屏障,对于维持肾小球滤过屏障结构与功能完整性发挥关键作用。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠肾足突细胞采用机械研磨过不同孔径不锈钢网筛结合胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠肾足突细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M067 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 MYOT 基因全长ORF克隆
大鼠 PTBP1 基因全长ORF克隆
大鼠 YWHAZ 基因全长ORF克隆
大鼠 CPXM1 基因全长ORF克隆
大鼠 NCSTN 基因全长ORF克隆
大鼠 SC5D 基因全长ORF克隆
大鼠 NUCB1 基因全长ORF克隆
大鼠 CAPN6 基因全长ORF克隆
大鼠 DDX18 基因全长ORF克隆
大鼠 HSP90AB1 基因全长ORF克隆
小鼠肾足突细胞3%NaCl 英文名称: 产品规格:20支
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gastrokine-2
1.56-100 ng/mL 人基础免疫球蛋白(Basigin)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Propionyl-CoA carboxylase beta chain, mitochondrial
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-secretase subunit PEN-2
固氮菌用阿须贝氏培养基 英文名称:Nitrogen-fixing bacteria with the A Sugai’s medium 产品规格:250g
增菌肉汤培养基E 英文名称:Enrichmentbroth medium E 产品规格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Macrophage mannose receptor 1
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Vigilin
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代) 英文名称:E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML)