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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0883 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠子宫颈上皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0883 |
商品介绍:
名称 大鼠子宫颈上皮细胞 2.组织来源:子宫组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠子宫颈上皮细胞分离自子宫颈组织;子宫颈位于子宫下部,近似圆锥体,上端与子宫体相连,下端深入阴道。阴道顶端的穹隆又将子宫颈分为两部分:宫颈突入阴道的部分称宫颈阴道部,在阴道穹隆以上的部分称宫颈阴道上部。宫颈的中央为前后略扁的长梭性管腔,其上端通过宫颈内口与子宫腔相连,其下端通过宫颈外口开口于阴道。内外口之间即宫颈管。宫颈的大小与宫体比例随年龄及内分泌状态等而变化;宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。子宫颈可有多种疾病,包括胚胎发育异常、炎症、瘤样病变、良性肿瘤、恶性肿瘤、损伤、宫颈性不孕、辅助生育技术、宫颈与性、宫颈妊娠等许多问题,体外培养的子宫颈上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠子宫颈上皮细胞采用先胶原酶消化、后组织贴块法,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠子宫颈上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R051 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 LGALS3 基因全长ORF克隆
小鼠 SPINT1 基因全长ORF克隆
小鼠 LGALS7 基因全长ORF克隆
小鼠 CD5 基因全长ORF克隆
小鼠 APP / PN2 基因全长ORF克隆
小鼠 Desmocollin-2 基因全长ORF克隆
小鼠 MS4A1 基因全长ORF克隆
小鼠 ENTPD1 基因全长ORF克隆
小鼠 ADAMTS15 基因全长ORF克隆
小鼠 GRN 基因全长ORF克隆
大鼠子宫颈上皮细胞硫乙醇酸盐流体培养基(2015药典) 英文名称: 产品规格:250g
3.12-200 U/mL ELISA Kit for Human Cytosolic phospholipase A2
0.156-10 ng/mL 人垂体腺苷酸环化激活肽类型Ⅰ受体ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL 人CD163抗原(CD163)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/ml 人肿瘤蛋白D52(Tumor protein D52)ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Heparin-binding growth factor 2
78-5000 pg/ml 人基质金属蛋白10(MMP-10/SL-2)ELISA试剂盒
6.25-400 ng/mL ELISA Kit for Human Hepatic triacylglycerol lipase
78-5000 ng/mL 动物源性成分(18S)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
0.78-50 ng/mL 人芳基硫酸酯A(ASA)ELISA试剂盒