021-39921927
产品简介
DC细胞的相关*：小鼠基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒现货供应小鼠基质金属蛋白2/明胶A(MMP2/Gel A)抗体免疫试剂盒*直销小鼠基质金属蛋白13(MMP-13)免疫试剂盒进口、组装小鼠基质金属蛋白10(MMP-10)免疫试剂盒进口、分装小鼠基质金属蛋白1(MMP-1)免疫试剂盒现货供应
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1429 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 1×10⁶Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| DC细胞 | 1×10⁶Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1429 |
商品介绍：
名称 DC细胞 DC细胞抗肿瘤机制如下： a)DC可以高表达MHC-Ⅰ类和MHC-Ⅱ类分子，MHC分子与其捕获加工的肿瘤抗原结合，形成肽-MHC分子复合物，并递呈给T细胞，从而启动MHC-I类限制性CTL反应和MHC-Ⅱ类限制性的CD4+Thl反应。同时，DC还通过其高表达的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T细胞活化所必须的第二信号，启动了免疫应答。 b)DC与T细胞结合可大量分泌IL-12、IL-18激活T细胞增殖，诱导CTL生成，主导Th1型免疫应答，利于肿瘤清除；激活穿孔素P颗粒酶B和FasL/Fas介导的途径增强NK细胞毒作用； c)DC分泌趋化因子(Chemotactic Cytokines，CCK)专一趋化初始型T细胞促进T细胞聚集，增强了T细胞的激发。保持效应T细胞在肿瘤部位长期存在，可能通过释放某些抗血管生成物质(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影响肿瘤血管的形成。上述CCK进一步以正反馈旁分泌的方式活化DC，上调IL-12及CD80、CD86的表达；同时DC也直接向CD8+T细胞呈递抗原肽，在活化的CD4+T细胞辅助下使CD8+T细胞活化，CD4+和CD8+T细胞还可以进一步通过分泌细胞因子或直接杀伤，增强机体抗肿瘤免疫应答。 DC刺激免疫反应有以下特点： 1.树突状细胞（DC)是人体内功能*的专职抗原递呈细胞，DC相当于信使，将抗原信息传递给T细胞，并具有活化T细胞的功能，很少量就可以激发强大的T细胞反应。 2.可致敏辅助T细胞的多种细胞因子，显著刺激初始型T细胞增殖，以激活体内静止状态的初始型T细胞（而巨噬细胞、B细胞仅能刺激已活化的或记忆性T细胞）。 3.帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫监视功能。机体的免疫系统具有完备的监视功能，但肿瘤细胞对机体的免疫系统有抵抗和抑制作用，使得免疫细胞不能识别和杀伤肿瘤细胞。在DC疫苗培养中用肿瘤抗原诱导DC使其致敏后，可将其抗原信息传递给T细胞，使T细胞重新识别和杀伤肿瘤细胞。 |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
EPHB1 / EPHT2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SORCS1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
KLK-8 / Kallikrein-8 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD32 / FCGR2B 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD64 / FCGR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD32b / FCGR2B 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD16-2 / FCGR4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CD32a / FCGR2A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
DC细胞分裂周期37样蛋白1抗体Human CMLC-1(Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit人抗透明带抗体（aZP）ELISA试剂盒,
羧肽X(M14家族1)抗体Human c-myc(c-myc Oncogene Product) ELISA Kit人球蛋白j链（Ig-j）ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白135抗体Human CNR1(Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit小鼠可溶性肌球蛋白重链1（sMHC-1）ELISA试剂盒,
跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体Human CNTNAP2(Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit小鼠多巴D1受体（D1R）ELISA试剂盒,
分子伴侣CESK1蛋白抗体Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit大鼠可溶性白介素6受体（sIL-6R）ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白124抗体Human CNX(Calnexin) ELISA Kit大鼠肾损伤分子1（Kim-1）ELISA试剂盒,
CDK5激活结合蛋白1抗体Human COL11α1(Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit大鼠生长（GH）ELISA试剂盒,
化表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体Human COL13(Collagen Type XIII) ELISA Kit大鼠抵抗素（Resistin）ELISA试剂盒,
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