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小鼠牙龈上皮细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-20
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1271
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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产品属性:   

产品名称

规格

货号

小鼠牙龈上皮细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1271

商品介绍:

名称    小鼠牙龈上皮细胞   

2.组织来源:牙龈组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠牙龈上皮细胞分离自牙龈组织;牙龈是附着在牙颈和牙槽突部分的粘膜组织,呈粉红色、有光泽、质坚韧。牙龈边缘称为龈缘,正常呈月芽形。龈缘与牙颈之间的小沟称龈沟。两邻牙之间的牙龈突起称龈乳突。也叫齿龈,通称牙床;是指包住齿颈的黏膜组织,粉红色,内有很多血管和神经。牙龈上皮长期被认为是抵御口腔中持续存在的细菌的被动免疫屏障,随着对牙周致病菌的不断认识,发现牙龈上皮不仅仅是抵御微生物的物理屏障,上皮细胞还可以分泌抗菌多肽,参与先天性免疫。牙龈上皮作为牙周组织的第一道屏障,在抵御牙周炎细菌入侵的过程中发挥了重要作用,建立正常牙龈上皮细胞体外培养体系,将为各种牙龈上皮相关的研究提供稳定的实验模型。

5.方法简介:

实验室分离的小鼠牙龈上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的小鼠牙龈上皮细胞Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件鼠尾胶原2-5μg/cm2

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M198

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 PAH / PH (415 Asn/Asp) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 VDR / NR1I1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 KIT / c-KIT / CD117 (aa 540-972) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 NELL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 Notch-1 / NOTCH1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠牙龈上皮细胞氧化钇 99.99% metals basis亚铈八水 99.9% metals basisHuman Protein Carbonyl,PC ELISA Kit   人羰基化蛋白

氧化钇 40nm 球形,99.5%亚铈八水 99.999% metals basishuman phospho-inhibitory subunit of NF-κB Alpha,pIKB Alpha ELISA kit  人化核因子κB抑制蛋白α(IKKα human ELISA kit)

氧化钇 99.99% metals basis ,50nm环十二酮 99%Human paxillin,Pax ELISA Kit  人桩蛋白

二氧化锆 AR,99.0%环十二碳三烯 98%Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit  人小表皮粘蛋白

二氧化锆 99.99% metals basis,50nm2-氯乙基苯硫 98%human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA kit   人类似60S核糖体蛋白L21

纳米氧化锌 99.9% metals basis,30±10nm1-苯基-炔 97%human orosomucoid 2,ORM2 ELISA Kit  人类粘蛋白2

纳米氧化锌 99.8% metals basis,90±10nm12-冠-4 98%human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit  人MAX二聚化蛋白1

纳米氧化锌 99.8% metals basis,50±10nm环戊 99.9%,含50ppm BHT 抑制剂human claudin 14,CLDN14 ELISA Kit  人水闸蛋白14

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