021-39921927
产品简介
NK细胞的相关*：小鼠肌球蛋白(MYS)免疫试剂盒进口、组装小鼠肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒进口、分装小鼠肌酐(Cr)免疫试剂盒现货供应小鼠饥饿激素(GHRL)免疫试剂盒*直销小鼠活性氧(ROS)免疫试剂盒进口、组装
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1431 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 1×10⁸Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| NK细胞 | 1×10⁸Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1431 |
商品介绍：
名称 NK细胞 NK细胞确切的来源还不十分清楚，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明，胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴结和骨髓中也有NK活性，但水平较外周血低。 由于NK细胞具有部分T细胞分化抗原，如80～90%NK细胞CD2+，20～30%NK细胞CD3+（表达CD3ζ链），30%NK细胞CD8+（α/α）和75～90%NK细胞CD38+，而且NK细胞具有IL-2中亲和性受体，在IL-2刺激下可发生增殖反应，活化NK细胞可产生IFN-γ，因此一般认为NK细胞与T细胞在发育上关系更为密切。 与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体β链(P75、CD122），CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。 一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性，而HNK-1(CD57）和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。 NK细胞活化途径： 1、通过CD3分子的ζ链 NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3ζ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。 2、通过CD2分子 CD2与CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK细胞，CD3ζ链发生酪氨酸磷酸化。 3、自然杀伤细胞刺激因子 自然杀伤细胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor，NKSF)对NK细胞有刺激作用。 IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin，LR)对NK细胞的活化和分化有正调节作用，体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。 NK细胞表面具有IL-2中亲和性受体，IL-2诱导NK的杀伤活性约需18-24小时。此外，IL-2还可诱导NK细胞的增殖，一般在刺激后3～4天开始发生增殖，其机理为IL-2可诱导NK细胞表达IL-2Rα链，新表达的α链与原先细胞表面的β链和γ链结合形成高亲和性受体，在IL-2存在下刺激NK细胞发生增殖。IL-2诱导NK细胞的活性机理尚不清楚，可能与增加细胞粘附分子的表达，提高对NK抵抗靶细胞的杀伤活性有关，还可能增加NK细胞胞浆中的颗粒以及丝氨酸酯酶mRNA的表达，活化和促进杀伤介质的杀伤作用。 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
CD16a / FCGR3A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD28 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD19 / Leu-12 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
COQ7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL-29 / Interleukin-29 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
恒河猴 ErbB2 / HER2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
恒河猴 ErbB2 / HER2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 ErbB2 / HER2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
NK细胞Saccharomyces cerevisiae血管内皮生长因子抗体检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae血浆蛋白检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae促性腺释放抗体检测试剂盒
Zygosaccharomyces rouxii补体受体1检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiaeβ-伴大豆球蛋白检测试剂盒
Kloeckera apiculata抗猪圆环病抗体检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae多氧化检测试剂盒
Torulaspora delbrueckii核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1检测试剂盒
当前位置：
上一个：
返回列表
ELISA试剂盒
