大鼠胰岛细胞的相关*:体液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)活性比色法定量检测试剂盒 20次通用型钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 50次细胞钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 20次组织钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 20次血液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 20次体液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 20次
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0747 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠胰岛细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0747 |
商品介绍:
名称 大鼠胰岛细胞 2.组织来源:胰腺组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠胰岛细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠胰岛细胞经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R015 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
JAM-B 基因全长ORF克隆
CCL26 基因全长ORF克隆
GPC1 基因全长ORF克隆
KLRK1 / CD314 / NKG2D 基因全长ORF克隆
FCN2 / Ficolin-2 转录变体SV0 基因全长ORF克隆
FGF10 基因全长ORF克隆
PDGF-B 基因全长ORF克隆
PTPN2 转录变体2 基因全长ORF克隆
TGFBI 基因全长ORF克隆
TCN2 基因全长ORF克隆
大鼠胰岛细胞CIN-1添加剂 英文名称: 产品规格:1ml*5
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Semaphorin-3A
0.78-50 ng/mL 人低密度脂蛋白受体相关蛋白2(LRP2)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Olfactory receptor 51E2
0.625-40 ng/mL 人Gremlin 1(GREM1)ELISA试剂盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Homeobox protein engrailed-2
0.78-50 ng/mL 人角化细胞富含蛋白(KPRP)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-2
0.312-20 ng/mL 空肠弯曲菌(CJ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
15.6-1000 pg/mL 人存活素(Surv)ELISA试剂盒