主动脉平滑肌细胞的相关*:组织肌酸激同工混合型(CK-MB)活性比色法定量检测试剂盒 25次体液肌酸激同工混合型(CK-MB)活性比色法定量检测试剂盒 25次细胞肌酸激同工混合型(CK-MB)活性连续循环比色法定量检测试剂盒 20次组织肌酸激同工混合型(CK-MB)活性连续循环比色法定量检测试剂盒 20次体液肌酸激同工混合型(CK-MB)活性连续循环比色法定量检测试剂盒 2
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0969 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
主动脉平滑肌细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0969 |
商品介绍:
名称 主动脉平滑肌细胞 2.组织来源:主动脉组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: 实验室分离的人主动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的人主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H081 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 ACAT2 基因全长ORF克隆
大鼠 HN1 基因全长ORF克隆
大鼠 UQCRQ 基因全长ORF克隆
大鼠 COX8B 基因全长ORF克隆
大鼠 TUBB5 基因全长ORF克隆
大鼠 PHYH 基因全长ORF克隆
大鼠 GAPDH 基因全长ORF克隆
大鼠 GNB2L1 基因全长ORF克隆
大鼠 NRAS 基因全长ORF克隆
大鼠 DECR2 基因全长ORF克隆
主动脉平滑肌细胞0.156-10 ng/mL 人丝裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)ELISA试剂盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-28A
半固体琼脂管 英文名称: 产品规格:6ml*10支
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-glutamyltranspeptidase 1
冻干兔血浆 英文名称:Freeze dried rabbit plasma 产品规格:0.5ml*10
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Aspartyl/asparaginyl beta-hydroxylase
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Cathepsin L1
0.312-20 ng/mL 人肽脯氨酰顺反异构FKBP8(PPIase FKBP8)ELISA试剂盒
葡萄糖半固体培养基 英文名称:Dextrose Semisolid Medium 产品规格:250g
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Glutaminase kidney isoform, mitochondrial