小鼠胚胎肝母细胞的相关*:小鼠整合素αM(Itgam/CD11b)免疫试剂盒进口、组装小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)免疫试剂盒进口、分装小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)免疫试剂盒现货供应小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)免疫试剂盒*直销小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒进口、组装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1331 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠胚胎肝母细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1331 |
商品介绍:
名称 小鼠胚胎肝母细胞 2.组织来源:胚胎;肝脏 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠胚胎肝母细胞分离自胚胎肝组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏起源于腹侧前肠内胚层细胞(一种多潜能干细胞)。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,前肠的原始上皮细胞接触心肌中胚层后快速增殖,形成肝原基。大约1d后,原始上皮细胞侵入原始横膈,继续分化为幼稚肝脏上皮细胞,这些细胞先表达 AFP 然后是ALb。幼稚肝脏上皮细胞很快成熟,并进一步分化为肝细胞或胆管上皮细胞,因为此期的肝脏上皮细胞其具有向这两种肝实质细胞双向分化的潜能,所以又称肝母细胞。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠胚胎肝母细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠胚胎肝母细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M224 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
雪貂 IFNG / Interferon Gamma 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 GM-CSF / CSF2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠胚胎肝母细胞2-氯乙基 98%醋酸丁酸纤维素 30-35%Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生长因子样域激2抗原
1-氯-3-甲氧基烷 98%1,4-环己烷二甲(顺+反异构体混合物) 99%Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2) 受体应答蛋白2抗原
4-基苯甲酸 98%一缩二 99%TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll样受体3抗原
4-氯丁酰氯 98%二乙乙 99%TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4) Toll样受体4抗原
6-氯-1-己 95%N,N-二甲基乙酰 ≥99.8%TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll样受体5抗原
98%N,N-二甲基乙 CP,98.0% TM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽
2,3,5-基吡 99%正癸酸 CP,98%Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原
二正 99%二甲基二甲氧基硅烷 97%TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗原