021-39921927
产品简介
NCI-H446 [H446] (小细胞肺癌细胞) 的相关*：细胞VEGF蛋白表达比色法定量检测试剂盒 10/50 次细胞VEGF蛋白表达荧光定量检测试剂盒 10/50 次VEGF蛋白表达西方杂交分析试剂盒 5次VEGF蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 5次VEGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 25次细胞BAD蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 10/20次
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0399 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H446 [H446] (小细胞肺癌细胞) | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0399 |
商品介绍：
名称 NCI-H446 [H446] (小细胞肺癌细胞) 别称H446; H-446; NCI-446; NCIH446 种属人类 年龄（性别）男性，61岁 组织来源肺；转移灶：肋膜渗出癌；小细胞肺癌 生长特性半贴半悬 细胞形态上皮细胞样 背景描述NCI-H446细胞是从一位小细胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。NCI-H446细胞是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元*的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶。NCI-H446细胞内左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。C-myc DNA序列扩增约20倍，c-myc RNA比正常细胞增加15倍。最初，传代培养基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氢化、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml铁传递蛋白、10nM 17-β-雌二醇、30nM)。 生物安全等级1 生长培养基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (The cells form transplantable tumors with non-typical SCLC histology). |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
BOLL 基因全长ORF克隆
COQ4 基因全长ORF克隆
ALKBH2 基因全长ORF克隆
ANP32B 基因全长ORF克隆
STC1 基因全长ORF克隆
CTDNEP1 基因全长ORF克隆
H6PD 基因全长ORF克隆
MMRN1 基因全长ORF克隆
MYO1C 基因全长ORF克隆
TUSC2 基因全长ORF克隆
NCI-H446 [H446] (小细胞肺癌细胞) 5g IPTG Solution（IPTG溶液）,20% IPTG Solution,20% 常温保存
5g 亮绿 SF( 淡黄 ) Light Green SF Yellowish 室温干燥保存
2 ug pLVPT-GDNF-tTR-KRAB pLVPT-GDNF-tTR-KRAB 低温运输，-20℃保存
含0.2%可溶性淀粉的BCP脱脂奶粉平板计数培养基 BCP Medium with 0.2% Soluble Starch 250g
1瓶 NCI-H596细胞株 NCI-H596 低温运输和保存
吐温稀释液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g
25mg 刀豆蛋白 A IV Con A Type IV -20℃保存
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