小鼠胰岛β细胞的相关*:猪胃泌酸调节素(OXM)免疫试剂盒进口、分装猪伪狂犬病毒(PRV)抗体(IgG)免疫试剂盒现货供应猪D(VD)免疫试剂盒*直销猪褪黑素(MT)免疫试剂盒进口、组装猪透明质酸(HA)免疫试剂盒进口、分装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1277 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠胰岛β细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1277 |
商品介绍:
名称 小鼠胰岛β细胞 2.组织来源:胰腺组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠胰岛β细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛β细胞,即胰岛B细胞,是胰岛细胞的一种,属内分泌细胞的一种,能分泌胰岛素,与胰岛α细胞分泌的胰高血糖素一起起到调节血糖的作用。胰岛B细胞功能受损、胰岛素分泌绝对或相对不足(胰岛素抵抗),会使血糖升高,从而引发糖尿病。而胰岛B细胞癌变会生成胰岛素瘤,引起恶性血糖降低症状。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠胰岛β细胞采用先用胶原酶消化分离得到胰岛、再用胰酶逐级消化胰岛制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠胰岛β细胞经Insulin含量检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M200 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 VEGF164 / VEGFA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SerpinB4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 PRL / Prolactin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PARP-3 / PARP3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 KYNU / Kynureninase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TH / Tyrosine Hydroxylase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TERF1 / TRF1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 THOP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠胰岛β细胞无水钠 CP,98%锌标准溶液 100μg/mlAnti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 荧光素标记化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体IgG
无水钠 SP锆标准溶液 1000μg/mlAnti-ARHI/FITC 荧光素标记ARHI蛋白抗体IgG
标准溶液 0.2500mol/L(0.5N)烯 CP,98.0%(剧品)Anti-ARIP2a/FITC 荧光素标记激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体IgG
无水钠 99.99% metals basis烯 AR,99.0% (剧品)Anti-ARIP2B/FITC 荧光素标记激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体IgG
标准溶液 0.05000mol/L(0.1N)烯 分析标准品(剧品)Anti-Aromatase P450/FITC 荧光素标记芳香化蛋白抗体IgG
无水钠 ACS, ≥99.0%莰烯 分析标准品Anti-Aromatase P450/FITC 荧光素标记芳香化/色素P450/P450抗体IgG
无水钠 农残级莰烯 75%Anti-ART/FITC 荧光素标记胶质系源性神经营养因子GDNF的一种抗体IgG
无水钠 for HPLC,≥99.0% (T)莰烯 95%Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 荧光素标记神经母特异性转移因子抗体IgG