小鼠真皮微血管内皮细胞的相关*:猪髓过氧化物(MPO)免疫试剂盒*直销猪水通道蛋白4(AQP-4)免疫试剂盒进口、组装猪水通道蛋白1(AQP-1)免疫试剂盒进口、分装猪双氢睾酮(DHT)免疫试剂盒现货供应猪输血传播病毒/辛型肝炎病毒抗体(IgG)免疫试剂盒*直销
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1279 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠真皮微血管内皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1279 |
商品介绍:
名称 小鼠真皮微血管内皮细胞 2.组织来源:皮肤组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比,对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞,则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M201 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 CHK2 / CHEK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ALDH3A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
类呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 SDF2 / SDF-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 PKC delta / PRKCD 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 PGK1 / PGKA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL17RB / IL-17 Receptor B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Hexokinase-3 / HK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠真皮微血管内皮细胞Pseudomonas ovalisCXC趋化因子配体1检测试剂盒
Cupriavidus oxalaticus轮状病检测试剂盒
Pseudomonas pavonaceae甲酰甲硫检测试剂盒
Pseudomonas pertucinogena抗小鼠抗体检测试剂盒
Pseudomonas pseudoalcaligenes多配体蛋白聚糖1检测试剂盒
Pseudomonas pseudoalcaligenes核因子κB受体激活因子配体检测试剂盒
Pseudomonas pseudoalcaligenes单纯疱疹病Ⅰ+Ⅱ型IgM抗体检测试剂盒
Pseudomonas pseudoalcaligenes拓扑异构1检测试剂盒