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产品简介
大鼠阴茎白膜成纤维细胞的相关*：小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗体免疫试剂盒现货供应小鼠抗线粒体ADP/ATP载体(AAC)抗体免疫试剂盒*直销小鼠抗透明带抗体IgG(aZP-IgG)免疫试剂盒进口、组装小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(IgM)免疫试剂盒进口、分装小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(IgG)免疫试剂盒现货供应
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1413 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠阴茎白膜成纤维细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1413 |
商品介绍：
名称 大鼠阴茎白膜成纤维细胞 2.组织来源： 阴茎白膜组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠阴茎白膜成纤维细胞分离自阴茎白膜组织；海绵体，又称海绵体肌，是最硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的阴茎白膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。阴茎白膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。 本公司的大鼠阴茎白膜成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶；细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 5.培养基信息： DMEM[H]、FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
GPR56 / TM7LN4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RET Kinase 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 AGRP / AgRP 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD93 / C1QR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD59a / MAC-IP 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD79B / B29 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 LRIG1 / LIG-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD33 / Siglec-3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD93 / C1QR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠阴茎白膜成纤维细胞白凡士林 医用级5-羧基荧光素琥珀酰亚酯 90%Anti-DDB2/FITC 荧光素标记损伤DNA结合蛋白2抗体IgG
黄凡士林 医用级5(6)-羧基荧光素 95%Anti-DDC/FITC 荧光素标记多巴脱羧抗体IgG
氢加兰他敏 98%5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚酯 96%Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 荧光素标记CD205抗体IgG
2,2,6-基-4H-1,3-二噁英-4-酮 90%6-羧基荧光素琥珀酰亚酯 90%Anti-Dectin-1/CLECSF12/FITC 荧光素标记C型凝集素结构域家族7成员A抗体IgG
Amberlite? IR-120阳离子交换树脂 钠型6-羧基四甲基罗丹明 for fluorescence, ≥90%Anti-Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 荧光素标记C型凝集素结构域家族6成员A抗体IgG
Amberlyst® 15离子交换树脂 湿6-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚酯 for fluorescenceAnti-Dectin-1/CLECSF12/RBITC 红色荧光素罗丹明标记C型凝集素结构域家族7成员A抗体IgG
Amberlite® XAD16非离子型大孔树脂 20-60 mesh4,’6-二脒基-2-苯基 98%Anti-DDX4/MVH/FITC 荧光素标记DDX4抗体IgG
Amberlite XAD7HP 离子交换树脂 Mesh 20-60二氢罗丹明123 95%Anti-Defensin Beta1/FITC 荧光素标记防御素β1抗体IgG
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