小鼠脂肪细胞的相关*:猪趋化因子配体28(CCL28)免疫试剂盒进口、分装猪氢化可的松(HYD)免疫试剂盒现货供应猪前列腺素G/H合2(PTGS2)免疫试剂盒*直销猪前列腺素F2α(PGF2α)免疫试剂盒进口、组装猪前列腺素E2(PGE2)免疫试剂盒进口、分装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1285 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠脂肪细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1285 |
商品介绍:
名称 小鼠脂肪细胞 2.组织来源:脂肪组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠脂肪细胞采用胰蛋白酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M203 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
RhoA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PDK-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
STK4 / MST1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CAMKV 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL-3 / Interleukin-3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PDE9A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RSK3 / RPS6KA2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠脂肪细胞Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、牛,马,犬,鸡化Smad2抗体IgG
Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 荧光素标记化信号转导分子SMAD2抗体IgG
Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 荧光素标记化信号转导分子SMAD2抗体IgG
Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 荧光素标记化信号转导分子SMAD3抗体IgG
Anti-Smad4/FITC 荧光素标记Smad4抗体IgG
Anti-Smad7/FITC 荧光素标记Smad 7抗体IgG
Anti-SMC1/FITC 荧光素标记染色体结构维持蛋白质1抗体IgG
Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 荧光素标记化染色体结构维持蛋白质1抗体IgG