大鼠髋臼软骨细胞的相关*:小鼠抗弓形虫IgM抗体免疫试剂盒现货供应小鼠抗单核细胞抗体(AMA)免疫试剂盒*直销小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)免疫试剂盒进口、组装小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫试剂盒进口、分装小鼠抗Smith抗体(Sm)免疫试剂盒现货供应
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1417 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠髋臼软骨细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1417 |
商品介绍:
名称 大鼠髋臼软骨细胞 2.组织来源:软骨组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠髋臼软骨细胞分离自髋关节软骨组织,髋关节是人体最大、的关节之一,是典型的球臼关节。髋关节既具有良好的内在稳定性,也具有灵活的活动性。髋臼位于髋骨外侧面中央,呈半球形深凹,直径约30~50mm,表面覆盖厚约2mm的透明关节软骨,呈半月形分布。中央是髋臼窝,无软骨覆盖,由哈佛腺充填,可以随关节内压力的增减挤出或者吸入关节液,以维持关节内压力的平衡。髋臼边缘的环形关节盂唇可以加深、加宽髋臼,使髋臼容纳股骨头的大部并处于稳定的位置,加强了髋关节的稳定性。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层,单个分布、体积较小、呈椭圆形,长轴与关节软骨表面平行,越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形、染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内,这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,关节软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,关节软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠髋臼软骨细胞采用胶原酶联合中性蛋白酶消化制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠髋臼软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R318 换液频率每2-3天换液一次; 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
F13B / Coagulation factor XIII B chain 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CFD / Adipsin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
雪貂 CD4 / Leu-3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CTSL / Cathepsin-L 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Epiregulin / EREG 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Arginase-1 / ARG1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CFD / Adipsin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠髋臼软骨细胞对羟基苯甲酸酯 GR,99.0%5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸苷 98.0%Anti-Nogo R/NGR /FITC 荧光素标记轴索过度生长抑制因子受体/Nogo受体抗体IgG
5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基) 97%烯式酮酸 99%Anti-Nitric oxide/NO/FITC 荧光素标记一氧化氮抗体IgG
结晶紫 AR马尿酸 98%Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS /FITC 荧光素标记一氧化氮合成-1抗体(神经型)IgG
乙二四乙酸二钠镁 98%1,6-二己烷 98%, 含铜屑稳定剂Anti-NOS-2/iNOS /FITC 荧光素标记一氧化氮合成-2抗体(诱导型)IgG
3-(4-吡基)-D- 98%5-己烯-1- 97%Anti-NOS-2/iNOS/FITC 荧光素标记一氧化氮合成-2抗体(诱导型)IgG
(S)-(+)-2--3-羟基-3-甲基丁酸 98%三氟磺酸 99%Anti-NuMA/FITC 荧光素标记核有丝分裂器NuMA蛋白抗体IgG
(2S,3R)-(+)-2--3-羟基-4-甲基戊酸 98%三氟磺酰氯 99%Anti-Phospho-NuMA (Ser395) /FITC 荧光素标记化核有丝分裂器NuMA蛋白抗体IgG
(S)-(-)-2--4-戊烯酸 98%死蜱 分析标准品,99%Anti-NUMB/FITC 荧光素标记膜相关蛋白Numb抗体IgG