小鼠神经星形胶质细胞的相关*:葡萄糖 氨 Casamino acid 细落直接PCR检测法 100次裂解液VII:细裂解溶液 20/50次裂解液VIII:细活性化蛋白制备溶液 20次
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1165 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠神经星形胶质细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1165 |
商品介绍:
名称 小鼠神经星形胶质细胞 2.组织来源:脑组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠神经星形胶质细胞分离自脑组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经星形胶质细胞,是哺乳动物脑内分布*泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板或称终足,有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上,因此这些脚板又被称为血管足或血管周足,靠近脑脊髓表面的脚板则附着在软膜内表面,彼此连接构成胶质界膜。细胞刚分离时呈圆形,24h后大部分细胞贴壁,均匀分布于瓶底,部分细胞伸出细小突起,培养4-5d后细胞数量明显增多,呈扁平、多角形,胞质丰富且核浆较少,细胞核呈椭圆形,偏于胞体一侧。神经星形胶质细胞是中枢神经系统的重要细胞组成,不仅具有支持功能,还能够合成及分泌多种神经活性物质,在维持神经元内外环境、生存、迁移、免疫调节、信号转导、轴突生长及功能整合等方面具有重要作用。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠神经星形胶质细胞采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠神经星形胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M157 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
glypican 4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠 RIPK3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠 CYR61 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
NMU 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
JAG1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
TLR6 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
CXCR4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
CTLA4 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
Smad3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
CXCL9 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠神经星形胶质细胞GADD153抗体Human RFNG (Beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase radical fringe) ELISA KIT人胃蛋白(PP)ELISA试剂盒,
中间丝蛋白β-synemin抗体Human SASH1(SAM and SH3 domain-containing protein 1) ELISA Kit人糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒,
MAP激激活死亡域蛋白4C抗体Human SASH3 (SAM and SH3 domain-containing protein 3) ELISA KIT人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒,
桥粒糖蛋白4抗体Human RHO (Rhodopsin) ELISA KIT小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒,
动力蛋白3抗体Human RBPMS2 (RNA-binding protein with multiple splicing 2) ELISA KITRVS 肉汤
δ连环蛋白/δ连环素/δ链接素(δ-catenin)抗体Human SERGEF (Secretion-regulating guanine nucleotide exchange factor) ELISA KIT1 0%NaCl胰胨水
胞浆接头蛋白Dok6抗体Human SELPLG (P-selectin glycoprotein ligand 1) ELISA KITα-淀粉(枯草杆)
胞浆接头蛋白Dok5抗体Human ALOX15B(Arachidonate 15-lipoxygenase B) ELISA Kit8-甲氧基补骨脂素 8-Methoxypsoralen