021-39921927
产品简介
大鼠冠状动脉内皮细胞的相关*：组织己糖激（HEXOKINASE）偶联反应比色法定量检测试剂盒 20次细胞甘油二脂酰激（DAG KINASE）连续循环比色法定量检测试剂盒 20次组织甘油二脂酰激（DAG KINASE）连续循环比色法定量检测试剂盒 20次细胞葡萄糖激（glucose kinase）比色法定量检测试剂盒 20次组织葡萄糖激（glucose kinase）比色法定量
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0971 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠冠状动脉内皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0971 |
商品介绍：
名称 大鼠冠状动脉内皮细胞 2.组织来源：冠状动脉 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠冠状动脉内皮细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布，是一薄层的专门上皮细胞，它形成冠状动脉的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最小的微血管。 5.方法简介： 实验室分离的大鼠冠状动脉内皮细胞采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠冠状动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R081 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 MKRN2 基因全长ORF克隆
大鼠 CCT3 基因全长ORF克隆
大鼠 LDHA 基因全长ORF克隆
大鼠 PGK1 基因全长ORF克隆
大鼠 ADK 基因全长ORF克隆
大鼠 YWHAH 基因全长ORF克隆
大鼠 TECR 基因全长ORF克隆
大鼠 APMAP 基因全长ORF克隆
大鼠 SRSF3 基因全长ORF克隆
大鼠 BPGM 基因全长ORF克隆
大鼠冠状动脉内皮细胞培养基B（EP标准） 英文名称： 产品规格：250g
0.156-10 ng/mL 病毒H5N1亚型(AIV-H5N1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
0.312-20 ng/mL 人β-防御素14(β-DF14)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL 人西梅脱寡肽(Thimet oligopeptidase)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ryanodine receptor 1
15.6-1000 pg/mL 人腺苷酸环化10(ADCY10)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myeloperoxidase
15.6-1000 pg/mL 生物蝶呤(biopterin)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL 人Toll样受体5(TLR5)ELISA试剂盒
胰蛋白胨水培养基 英文名称：Trytone Water medium 产品规格：250g
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