乳腺上皮细胞的相关*:血液甘油三酯(triglyceride)含量连续循环反应比色法 20次定量检测试剂盒 体液甘油三酯(triglyceride)含量连续循环反应比色法 20次定量检测试剂盒 (Bilirubin)定量检测试剂盒 50次唾液酸(SA)比色法定量检测试剂盒 50/100次
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0753 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
乳腺上皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0753 |
商品介绍:
名称 乳腺上皮细胞 2.组织来源:乳腺组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人乳腺上皮细胞分离自乳腺组织;乳腺是复管泡状皮肤腺,主要由腺上皮细胞组成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,导管末梢发育成腺泡;近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系,体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织,乳腺由导管和腺泡组成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控,其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮细胞分离自分娩后3-5天的乳腺组织,为贴壁生长型细胞,呈多角形、圆形以及短梭形;乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。 5.方法简介: 实验室分离的人乳腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的人乳腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H017 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Tie1 基因全长ORF克隆
THBS1 / Thrombospondin-1 基因全长ORF克隆
IL17Rd 基因全长ORF克隆
CST5 基因全长ORF克隆
TPSB2 基因全长ORF克隆
CPA1 基因全长ORF克隆
CA III 基因全长ORF克隆
CCL18 基因全长ORF克隆
CPB1 基因全长ORF克隆
CA5-A 基因全长ORF克隆
乳腺上皮细胞0.625-40 ng/mL 人脱羟(ODC)ELISA试剂盒
匹克氏肉汤基础A 英文名称:Pick’s Broth BaseA 产品规格:100g
0.312-20 ng/mL 人类胰岛素生长因子1受体(Insulin-like growth factor 1 receptor)ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL 人NF-κ-B基本调节剂( NEMO)ELISA试剂盒
78-5000 pg/mL 高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Profilin-2
78-5000 pg/mL 人钙蛋白2催化亚基(Calpain-2 catalytic subunit)ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL 人蛋白O-甘露糖基转移1(POMT1)ELISA试剂盒
胆硫乳琼脂(DHL) 英文名称:Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar 产品规格:250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 4