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产品简介
大鼠浦肯野细胞的相关*：小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫试剂盒进口、组装小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒进口、分装小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫试剂盒现货供应小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫试剂盒*直销小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫试剂盒进口、组装
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1419 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠浦肯野细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1419 |
商品介绍：
名称 大鼠浦肯野细胞 2.组织来源：小脑组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠浦肯野细胞分离自小脑皮质组织；小脑的表面被覆着一层灰质，叫小脑皮质，小脑皮质分为3层，从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞（Purkinje cell）是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强，传导速度快，可达4000mm/s。属快反应自律型细胞，具有舒张期自动除极化的性能，因而有自律性，但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。小脑：浦肯野细胞是小脑皮质中最大的神经元，细胞体呈梨形，顶端发出2~3条粗大的主树突，向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂，形如展开的、扁薄的扇形，铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘，与传入纤维构成广泛的突触联系，接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部（与主树突相对方向）发出，细长，离开胞体不远便形成有髓神经纤维，向内经颗粒层离开皮质进入白质，组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大，约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列，几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束，小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少，胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统，但膜电容比收缩细胞大，可能是由于其闰盘结构广泛而复杂，提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接，粒着膜占的比例很少，这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。 5.方法简介： 实验室分离的大鼠浦肯野细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶 6.质量检测： 实验室分离的大鼠浦肯野细胞经Neph3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml） 培养基含脂质浓缩液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R319 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态神经元细胞样 传代特性不增殖；不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
FAP / Seprase 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 Cathepsin-B / CTSB 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
GPNMB / HGFIN 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 IL1R1 / CD121a 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
uPAR / CD87 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CLEC3B / Tetranectin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠浦肯野细胞Bacillus subtilis subsp. subtilis尼克酰腺嘌呤二核苷酸氧化5检测试剂盒
Bacillus subtilis subsp. subtilis低氧诱导因子-1β检测试剂盒
Bacillus subtilis subsp. subtilis白介素38抗体检测试剂盒
Bacillus subtilis subsp. subtilisCD27分子检测试剂盒
Bacillus pumilusDeltaFosB检测试剂盒
Bacillus pumilus异戊烯基腺嘌呤核苷检测试剂盒
Bacillus pumilus生长调节致癌基因γ检测试剂盒
Bacillus pumilus球蛋白k可变1D-13检测试剂盒
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