产品简介

OKT 3 (小鼠杂交瘤细胞(抗CD3))的相关*：EB病毒DNA纯化试剂盒 20次
HSV病毒DNA纯化试剂盒 20次
HHV病毒DNA纯化试剂盒 20次
小量真/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 20次
革兰氏阳性细基因组DNA纯化试剂盒 20次
革兰氏阴性细基因组DNA纯化试剂盒 20次

冷冻保存细胞之方法？

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

产品属性：  

商品介绍：

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 PCDHA10 基因全长ORF克隆

 HS6ST2 基因全长ORF克隆

 CAPN2 基因全长ORF克隆

 GCDH 基因全长ORF克隆

 EEF1G 基因全长ORF克隆

 PLIN3 基因全长ORF克隆

 SDPR 基因全长ORF克隆

 SOX7 基因全长ORF克隆

 CTSW 基因全长ORF克隆

 M6PR 基因全长ORF克隆

OKT 3 (小鼠杂交瘤细胞(抗CD3))PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（2015药典） Buffered Sodium Chloride – Peptone Solution 250g

20次 包涵体微量纯化试剂盒 Inclusion Body Miniprep Kit 4℃保存（和核酸清除剂需要-20℃保存，包涵体溶解液室温保存）

2 ug pSUOER-retro-neo pSUOER-retro-neo 低温运输，-20℃保存

50次 TRIzol伴侣 TRIzol-Mate 常温

2 ug pCMV-Tag 2B pCMV-Tag 2B 低温运输，-20℃保存

动力-硝酸盐培养基（A法） Power - nitrate medium 250g

500g 亚铁化钾 ( 三水合 ) Potassium Ferrocyanide Trihydrate 室温密封干燥保存