L6 (大鼠成肌细胞)的相关*:胆盐乳糖对照培养基 规格: 3.6g/100ml89-80-5胡;Menthone 规格: 0.2ml62006-39-7洋川芎内酯A 规格: 20mg73590-58-6 规格: 100mg26116-89-2闹羊花II 规格: HPLC≥98%;20mg239881风信子 规格: 20mg52286-58-5人参皂Rf 规格: HPLC≥98%
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0135 |
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规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
L6 (大鼠成肌细胞) | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0135 |
商品介绍:
名称 L6 (大鼠成肌细胞) 别称L-6; L-6 myoblast 种属大鼠 年龄(性别)不详 组织来源骨胳肌;成肌细胞 生长特性贴壁细胞 细胞形态成肌细胞样 背景描述L6成肌细胞是由Yaffe从甲基胆蒽存在下大鼠大腿肌的原代培养物最初两代中分离得到。L6细胞在培养基中可融合形成多核的肌管和横纹肌纤维。L6细胞融合的程度随着代数的增加而下降;因而,L6细胞应冷冻于低代次阶段并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。如果让培养容器中的细胞长满,L6细胞的成肌组分将迅速耗尽。 生物安全等级1 生长培养基DMEM+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 基因表达情况myosin |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
去乙酰化Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫试剂盒进口、组装
兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒进口、组装
小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)免疫试剂盒进口、分装
牛羟脂酰辅A脱氢免疫试剂盒*直销
猪瘟抗体(IgM)免疫试剂盒*直销
β淀粉状蛋白A4 免疫试剂盒*直销
小鼠钙调素(CAM)免疫试剂盒进口、分装
猪热休克蛋白40(HSP-40)免疫试剂盒现货供应
鱼乙酰酯(AChE)免疫试剂盒现货供应
大鼠血管性血友病因子裂解(vWF-cp)免疫试剂盒进口、分装
L6 (大鼠成肌细胞)2 ug pYr-1.2-mU6-EGFP pYr-1.2-mU6-EGFP 低温运输,-20℃保存
50次 柱式无内毒素质粒DNAout Column Endo-free Plasmid DNAOUT 常温
2 ug pEYFP-Tub pEYFP-Tub 低温运输,-20℃保存
采样吸取液1-GVPC液体培养基添加剂 1ml*3支/管
1瓶 A2780细胞株 A2780 低温运输和保存
1个 15mLDNA超滤离心管(150-250KD)
100次 总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS快速法) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存